0.25%胰蛋白酶消化液(溶于 PBS,含 EDTA,含酚红)产品简介
胰蛋白酶(Trypsin)简称胰酶,是一种丝氨酸水解酶,能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基端 切断。在组织细胞的提取、培养,以及体外细胞培养过程中,均会使用到胰蛋白酶消化液,用于水解细胞 间蛋白质,使组织或细胞离散成单个细胞。胰酶在 37℃ pH 8.0 条件下消化能力最强。常用胰酶工作浓度 为 0.25%。EDTA 可以螯合钙镁离子,胰酶溶液中搭配 EDTA 使用可以加速细胞间连接蛋白的水解,起到 增强消化的效果。
本产品关注点
含有(+) • 2.5 g/L 胰蛋白酶、0.38 g/L EDTA ·4Na
0.25%胰蛋白酶消化液(溶于 PBS,含 EDTA,含酚红)产品参数
物理外观 | 红色澄清液体 |
渗透压 | 270~320mOsm/kg |
pH 值 | 7.1-8.0 |
无菌 | 无菌过滤 |
经过测试 | 体外生物测定 |
0.25%胰蛋白酶消化液(溶于 PBS,含 EDTA,含酚红)使用说明
贴壁细胞
1.从冰箱中取出本产品后在常温下放置,每隔 20 分钟轻微晃动以促进均匀解冻,至充分解冻后可立即使 用。解冻后的产品在 4℃保存不可超过一个月。
2. 吸去细胞培养液,用无菌的 PBS、D-Hank ’s 液或无血清培养液洗涤细胞去除残余的血清。
3. 加入适量本产品覆盖细胞,室温静置消化 1-5 min。
4. 显微镜下观察,当细胞出现明显收缩(用移液枪轻轻吹打细胞较容易将细胞吹打下来),吸除胰酶细胞 消化液,加入含血清的细胞培养液,轻轻吹打细胞,制成细胞悬液,即可直接传代培养。如果用移液枪轻 轻吹打时很难使细胞从板底脱落,表明消化时间不够,可加入胰酶细胞消化液重新消化。注意避免过度消 化。
保存条件
-30~ +5℃保存,12 个月内有效。
注意事项
1. 由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定最佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否 则会影响细胞贴壁和生长状况。
2. 本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染。
3. 本产品不宜 4℃长期保存,避免反复冻融,建议分装成小份后-20℃保存。
4. 对于胰酶中 EDTA 、酚红的选择,可以根据实验需要,对于一般的肿瘤细胞,选择含 EDTA 的胰酶消化 液。对于较敏感、脆弱的细胞,例如原代细胞及很容易消化的细胞,选择不含 EDTA 的胰酶消化液,如果 细胞特别敏感,需要选择胰蛋白酶浓度更低的消化液。如果需要用于流式细胞仪检测细胞凋亡,则选用不 含 EDTA 的胰酶消化液。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品仅供科研用途,不用于临床诊断!