Gibco™ StemFlex™ 培养基

Gibco™ StemFlex™ 培养基支持无滋养层多能干细胞 (PSC) 的稳定扩增，经过优化可支持单细胞传代、基因编辑和重编程等新型应用。StemFlex 培养液独特的配方通过灵活的滋养时间表（包括周末无需滋养选项）提供了便利，并且支持选择适合特定应用的基质和传代试剂。StemFlex 培养基可实现长期的无滋养层 PSC 培养而没有任何核型异常，并保持了细胞分化为全部三个胚层的能力。

在过去十年中，干细胞研究界已从传统的方法转向更具创新性的技术和应用领域，包括基因组编辑和单细胞分析。上述新应用已经在相关的生理学疾病模型方面取得了巨大的进步，会引起干细胞前所.未.有的应激水平，常常会影响细胞存活。Gibco™ StemFlex™培养基采用了独特的配方，通过上述应激转换支持细胞生长，相比传统培养基，可提供稳定的结果和出众的性能(图1–3)。

图1. StemFlex培养基可将基因编辑后的细胞复苏速度提高2倍。使用Gibco™ TrypLE™ Select酶将不同培养基配方中扩增的PSC制备成单细胞，通过电穿孔导入Cas9蛋白/HPRT向导RNA (gRNA)复合体。在Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂不存在的条件下，每孔接种
100,000个活细胞，结果显示，在上述应激性事件后，StemFlex培养基可实现最佳的细胞复苏。

图2. StemFlex培养基可支持流式分选后的PSC复苏，在ROCK抑制剂不存在的情况下，单细胞传代后的克隆扩增率提高达5倍。使用TrypLE Select酶将StemFlex培养基中(基质为rhLaminin-521)扩增大于3代的PSC制备成单细胞，然后进行流式分选，分选出活的多能性干细胞(TRA1-60阳性，碘化丙啶(PI)阴性)，在96孔板的每个孔中接种1、3或5个细胞。接种后，每3天使用新鲜培养基饲养细胞，第14天，在IncuCyte ZOOM™ 系统(Essen Bioscience)上进行全孔成像，评估汇合度>5%的培养孔的百分比。

图3. StemFlex培养基可提供改进的工作流程和可靠的集落形成性能，在体细胞重编程后用于克隆筛选。使用 Invitrogen™ Cytotune-iPS 2.0 仙台病毒重编程试剂盒重编程人真皮成纤维细胞。遵照标准工作流程，在加入干细胞培养基后的第8天，使用mTeSR™1培养基(STEMCELL Technologies) (每天更换一次培养基)或StemFlex培养基(每两天更换一次培养基)饲养细胞。(A) 使用StemFlex培养基可以观察到可靠的集落形成。(B) 在全部三个供体中，与每天使用mTeSR1培养基的培养方案相比，每两天使用一次StemFlex培养基的培养方案具有更高的重编程
效率。

卓越的结果
StemFlex 培养基配方可为当今较为复杂的给 PSC 培养带来压力的应用提供卓越的结果，如重编程、单细胞传代和基因编辑。与领先的竞争产品 (mTeSR1) 相比，StemFlex 培养基可提供出色的细胞存活率，帮助在较为相关的细胞类型中取得更大的成功。

灵活性
培养基可为 PSC 培养条件提供 3 向使用灵活性：能够选择较优的滋养时间表，包括一个无需周末滋养的选项；根据工作流程需求选择基质；以及用于选择所需细胞解离水平的传代试剂的选项。

优异的价值和性能
StemFlex 培养基以一种便利的两组分试剂盒（450 mL 基础培养基和 50 mL 补充剂）形式提供，在与 Geltrex™ 无 LDEV、hESC 合格的低生长因子基底膜基质配合使用时，可为人 PSC 无饲养层培养提供一种经济高效的稳健系统。StemFlex 培养基能够实现无需周末滋养的 PSC 培养，为当今市场上稳健的无滋养层 PSC 培养基提供了非常高的价值。

常见问题解答