SPIDER邻近标记 | 膜蛋白Pull Down试剂盒

   这款产品用于完整细胞检测，适用于活细胞表面结合蛋白/靶标蛋白的筛选和发现，是一款膜蛋白受体鉴定的有效工具。

 受体鉴定是生命科学研究中的重要问题。与可溶性蛋白质之间的蛋白质-生物分子相互作用相比，涉及受体-配体等膜蛋白的蛋白质-生物分子相互作用的研究更具挑战性，因为传统蛋白质鉴定方法中，维持蛋白质构象和活性较为困难。

SPIDER技术是一种新型邻近标记技术，可兼容活细胞，直接捕获细胞表面、处于天然状态的靶标蛋白，在受体鉴定领域具有显著的技术优势。当细胞膜表面的靶蛋白(Prey)与带有生物素标记的生物分子(Bait)发生相互作用时，会同时与偶联了生物素的SA_m-Pup^E靠近，在 PafA 酶的催化作用下，Pup^E 的C末端会与Prey蛋白表面的赖氨酸残基共价相连，从而实现对靶蛋白的捕获。该过程将生物分子与蛋白质之间的非共价结合相互作用转换为SA_m-Pup^E与靶蛋白的共价连接，从而能够稳定地用于后续靶蛋白的富集、鉴定和分析。

应用案例：

为了测试SPIDER识别细胞表面配体的能力，我们首先检验了SARS-CoV-2 S1蛋白与其已知受体ACE2之间的相互作用，SPIDER反应直接在培养皿中进行（如下图A），我们观察到SPIDER反应前后细胞死亡率无变化。通过显示ACE2-SA_m-Pup^E的迁移变化确认了SARS-CoV-2 S1与ACE2之间的结合（如下图B）。