血蓝蛋白(未活化,来源于对虾,KLH替代物)
Native SHC protein
本产品4℃运输;-20℃保存,保质期12个月。
货号规格
goodHW101S 10 mg
goodHW101 100 mg
goodHW101L 100 mg×10
产品特点
gd高免疫原性——可完美替代 KLH;
gd高得率偶联——偶联效率与 KLH 相同;
gd高 溶 解 度——溶解度显著高于 KLH,兼容不常见或溶解性很差的半抗原;
gd高 纯 度——纯度大于 98%;
gd性 能 卓 越——已经过数百例抗体制备验证;
gd高 性 价 比——价格远低于 KLH。
产品简介
good虾血蓝蛋白(SHC)是一种源于对虾的高可溶性血蓝蛋白,可替代钥孔帽贝血蓝蛋白(KLH),作为载体蛋白与多肽、核酸、药物或毒素等低分子量分子偶联,使其具备高免疫原性。经测试,SHC具有与KLH相当的免疫原性,而其溶解度(尤其是在与半抗原偶联后)则显著高于KLH,从而使免疫原制备方案具有更大的灵活性。
good产品形式:血蓝蛋白以超纯水溶解的冻干形式提供。使用时,可根据需要加入合适的溶液重悬。
产品参数
使用方法
SHC 活化及半抗原偶联
SMCC 活化
1. 使用适量超纯水将 SHC( 未活化 ) 冻干粉复溶为 20 mg/mL 的 SHC 溶液;
2. 向 1 mL 复溶后的 SHC 溶液中加入 800 µL 超纯水配制的 SMCC 溶液 ( 5 mg/mL,现配现用 );
3. 置于混匀仪上温和翻转,室温孵育 60 min 或 37℃孵育 30 min;
4. 使用分子筛层析除去过量的 SMCC。
与半抗原偶联
1. 将 20 mg 含有巯基的半抗原溶解于 5 mL 偶联缓冲液 (83 mM sodium phosphate, 0.1 M EDTA, 0.9 M NaCl, 0.1 mM TCEP, pH 7.2) 中;
注意:0.1 mM TCEP 不是必需的,它的主要作用是将半抗原的二硫键还原成巯基。
2. 立即将半抗原溶液与活化后的 SHC 按照质量比 1 : 0.6 混合,室温反应 2 h 或 4℃过夜反应;
注意:该偶联比例为推荐比例。不同半抗原大小和结构的差异会影响偶联效率,为确保更有效的偶联,需根据具体情况,对半抗原和 SHC 偶联比例进行多次预实验验证。
3. 使用分子筛层析除去 EDTA。
EDC 活化与半抗原偶联
EDC 活化
1. EDC 和 NHS 在使用前需平衡至室温;
2. 使用适量激活缓冲液 ( 0.1 M MES, 0.5 M NaCl, pH 6.0) 将 SHC( 未活化 ) 冻干粉复溶为 1 mg/mL的 SHC 溶液;
3. 向 1 mL 上步配制的 SHC 溶液中加入 0.4 mg EDC 和 0.6 mg NHS,混匀,室温反应 15 min;
4. 向反应液中加入 1.4 µL β- 巯基乙醇使 EDC 失活;
5. 使用分子筛层析除去过量的 EDC、NHS 和β- 巯基乙醇。
与半抗原偶联1. 向活化后的 SHC 溶液中加入等摩尔量的半抗原 ( 溶解于 PBS 中 ),室温反应 2 h;2. 向上步反应液中加入终浓度为 10 mM 的羟胺 (hydroxylamine) 终止反应;3. 使用分子筛层析除去过量的羟胺。
注意事项
good1. 本产品定量精确,请在原装管内按照所需浓度直接溶解使用;请勿对本产品进行分装,否则会因产品性状 / 静电等原因造成较大损失;
good2. SHC 预测消光系数为 10,如需要测定 SHC 溶液浓度请调整消光系数;
good3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
good4. 本产品仅限科研使用。