可室温运输。密封状态下可长期储存,避免不必要的暴露于空气中。如因温度低或长时间放置出现沉淀,摇匀即可使用。BSA标准品常用时保存在4度,不常用时保存在-20度,如出现微生物污染则应丢弃。
货号:PD-BCA-E2,成分:63毫升组分A,60毫升组分B,3毫升组分C,1毫升BSA标准品(5毫克/毫升),可供120个试管或8块96孔板测试用。
货号:PD-BCA-E,成分:250毫升组分A,240毫升组分B,12毫升组分C,4毫升BSA标准品(5毫克/毫升),可供480个试管或32块96孔板测试用。
增强型BCA蛋白定量试剂盒与普通的BCA蛋白定量试剂盒原理相同,都是基于二喹quinoline啉甲酸比色法的总蛋白检测和定量试剂盒,区别在于采用了浓缩型试剂配方,提高了孵育时间和温度,因此可以增加样品体积和增加光吸收值,从而能够检测更低浓度的蛋白,检测范围可低至0.5到20 μg/ml。
注意事项:
测定蛋白浓度时,最好使未知样品的蛋白浓度处于标准拟合曲线的接近中间位置,这样获得的结果更准确。
通过增加孵育时间或者提高样品比例,可以提高光吸收值,从而检测更低的蛋白量,但是会缩小检测范围,可根据实际需要进行调整,同时注意不要超过仪器的检测上限。
最适检测波长为562 nm。在540 nm到590 nm区间也可进行检测, 但标准曲线斜率和检测灵敏度都会有所降低。
酶标仪的检测光径比分光光度计的比色杯短,因而检测灵敏度有所降低。
每种常用的总蛋白测定方法测定不同的蛋白时都有一些偏差。导致产生这些偏差的原因有:蛋白质的氨基酸序列,等电点,蛋白的结构,特定种类的氨基酸侧链和辅基。有些种类的氨基酸侧链和辅基能对显色反应产生很大的影响。大部分蛋白测定方法都使用牛血清白蛋白(BSA)或免疫球蛋白(IgG)作为标准品来制作标准曲线。如果需要特别精确的检测结果,可以使用待测蛋白的纯品来制作标准曲线。
一些物质可以干扰BCA反应,如还原剂、络合剂,以及强酸和强碱。还有一些物质干扰较小,只要不超过最大兼容浓度即不影响反应的进行。
本产品仅限于专业人员的科学研究用。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关产品:
极敏型ECL化学发光底物试剂盒
超敏型ECL化学发光底物试剂盒
BCA蛋白定量试剂盒
Bradford法蛋白定量试剂盒
去垢剂兼容型Bradford试剂盒
常见问题
问题 | 可能原因 | 解决办法 |
没有颜色 | 样品中含有铜离子络合剂 | 1,透析,脱盐,或稀释样品; 或2,提高工作液中铜离子的浓度,如将组份C的比例增加一倍; 或3,使用蛋白沉淀法去除干扰物 |
空白对照孔光吸收值正常,但是蛋白标准品和待测样品光吸收值低于预期 | 样品所用溶剂是强酸碱性缓冲液,改变了工作液的pH值 | 透析,脱盐,或稀释样品 |
光吸收波长选择错误 | 在562 nm读取光吸收值。 | |
待测样品孔光吸收值高于预期 | 蛋白浓度过高 | 稀释样品 |
样品中含有脂类或脂蛋白 | 向样品中加入2% SDS以除去脂类干扰 | |
使用蛋白沉淀法去除干扰物 | ||
所有孔,包括空白对照孔,呈暗紫色 | 缓冲液中含有还原剂 | 1,透析或稀释样品; 或2,使用蛋白沉淀法去除干扰物 |
缓冲液中含有硫醇 | ||
缓冲液中含有生物胺(儿茶酚胺) | ||
需要用不同的波长读取光吸收值 | 酶标仪或分光光度计没有562 nm滤光片 | 可以读取540 nm到590 nm区间的光吸收值, 但是标准曲线的斜率和检测灵敏度都会降低。 |