BCA蛋白定量试剂盒
货号:PD-BCA-125,成分:125毫升组分A,3毫升组分B,1毫升BSA标准品(5毫克/毫升),可供62个试管或6块96孔板测试用。
货号:PD-BCA-500,成分:500毫升组分A,12毫升组分B,2毫升BSA标准品(5毫克/毫升),可供250个试管或25块96孔板测试用。
室温运输和储存。如因温度低或长时间放置出现沉淀,将其摇匀即可使用。BSA标准品保存在-20度,如出现微生物污染则应丢弃。
一、BCA蛋白定量试剂盒的定义与用途
BCA(Bicinchoninic Acid)蛋白定量试剂盒 是一种基于 铜离子-蛋白质络合反应 的化学分析工具,广泛应用于实验室中测定 溶液中蛋白质总含量。其通过检测蛋白质与铜离子在碱性条件下生成的紫色络合物的吸光度(通常在 562nm 波长),定量分析蛋白质浓度,适用于 细胞培养上清、组织匀浆、血清、尿液 等多种样本。
二、BCA法的核心原理
铜离子的氧化还原反应
在碱性缓冲液(pH 8.5)环境中,铜离子(Cu²⁺)与蛋白质中的肽键和氨基发生反应,生成Cu⁺和NH3。
BCA试剂中的碳酸钠和NaOH提供碱性环境,加速反应。
紫色络合物的形成
BCA试剂中的双辛酰亚胺酸(DCTA)与铜离子结合,形成Cu-DCTA²⁺复合物。
当蛋白质存在时,铜离子被还原为Cu⁺,并与双辛酰亚胺酸和BCA试剂中的其他成分(如硫醇基团)结合,生成紫色络合物(最大吸收峰 562nm)。
定量关系
蛋白质浓度与紫色络合物的吸光度呈线性正相关,可通过标准曲线计算待测样本的蛋白质含量。
三、BCA蛋白定量试剂盒的优势
高灵敏度与准确性
检测范围广(通常 0.1–10mg/mL),最低可检测 10μg/mL 的蛋白质。
重复性好,CV值(批间变异系数)通常低于 5%。
兼容性强
抗干扰能力强:对大多数缓冲液(如PBS、RIPA)中的常见离子(如Na⁺、K⁺)耐受性高。
操作简便快捷:样本与试剂混合后直接测定,无需离心或过滤。
快速显色:反应时间约 30–60分钟,适合高通量分析。
稳定性好:试剂盒可长期保存,开封后短期内使用无显著活性损失。
四、实验注意事项
含强还原剂(如β-巯基乙醇)的样本需先中和。
校准标准曲线:首次使用或跨批次实验时,建议重新校准标准曲线。
五、总结
BCA蛋白定量试剂盒凭借其高灵敏度、操作简便和广泛兼容性,已成为实验室蛋白质定量的重要工具。其基于铜-蛋白质络合反应 的原理,解决了传统方法中试剂不稳定、干扰多等问题,特别适合需要快速、准确分析蛋白质含量的场景。通过合理使用BCA试剂盒,研究人员可高效完成蛋白质定量实验,为后续研究奠定可靠基础。
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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