超敏型 ECL化学发光底物试剂盒(超敏ECL发光液)
货号:ECL-P-100,规格:60+60毫升
货号:ECL-P-500,规格:250+250毫升
避光保存,不可结冰。室温可保持稳定两年以上;长期不用,建议置于4 ºC保存延长有效期。
超敏型 ECL化学发光底物试剂盒(简称超敏ECL发光液)的原理是基于鲁米诺在碱性条件下与过氧化氢反应,在辣根过氧化物酶(HRP)的催化作用下生成一种不稳定的过氧化物,该过氧化物随即分解并产生激发态中间体,当其回到基态时发出光子,形成荧光信号。在发光过程中,增强剂(如苯胺类、苯酚类、噻吩嗪类、吡啶类等化合物)对发光效果有显著影响,能够提高鲁米诺的发光强度和灵敏度,从而增强ECL化学发光的整体效果。
超敏型ECL发光液广泛应用于Western Blotting(蛋白质印迹技术)中,用于检测蛋白质的表达情况。通过电泳分离蛋白质后,将其转移到膜上,再利用抗体进行检测。
超敏型ECL化学发光底物试剂盒用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶(HRP)的抗体、抗原或者核酸。蛋白质或核酸在电泳后转移到印迹膜上,以HRP标记的抗体或探针结合膜上的目的蛋白或核酸,洗膜后置于用本产品配制的ECL工作液中,室温孵育数分钟,HRP使工作液中的鲁米诺(Luminol)氧化并发光,试剂中添加的增强剂可以使得这种发光大大增强。此光经X光胶片或者电子装置感光记录下来,可清晰显示蛋白质或核酸条带。本试剂盒灵敏度高,背景低,最低检测灵敏度可达高飞克(femtogram)级,适用于检测痕量蛋白或核酸。由于采用了独特配方,发光信号持久,能进行多次曝光,30min后仍可维持约90%的发光强度,6小时后仍能维持60%以上的发光强度。与普通 ECL 化学发光底物相比,可明显减少一抗和二抗的使用量。
注意事项:
1.PVDF膜较硝酸纤维膜能更好的结合蛋白,因此呈现较强的信号。选高质量的PVDF膜;尽可能不用尼龙膜。
2.与抗体结合以后,要保证膜处于湿润状态,否则会导致背景较高。
3.背景过高原因:转移膜封闭不充分;与抗体孵育后洗涤不充分;膜在处理过程中过干;二抗用量过多等。
本产品仅供研究使用。
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