BeyoLytic™昆虫活性蛋白抽提试剂

碧云天生产的BeyoLytic™昆虫活性蛋白抽提试剂(BeyoLytic™ Insect Active Protein Extraction Reagent)，也称BeyoLytic™ Insect Native Protein Extraction Reagent，是一种用于快速、高质量、高产量、高活性提取昆虫细胞如Sf 9和Sf 21等或昆虫组织的细胞浆蛋白、细胞核蛋白以及膜蛋白的昆虫活性蛋白抽提试剂。本产品对于细胞浆的蛋白的抽提效果优于细胞核和细胞膜的蛋白。

本产品与Thermo的I-PER^® Insect Cell Protein Extraction Reagent (89802)非常相近，使用效果和用途也非常相近，很多时候可以考虑相互替代。

本产品是一种含有特定的经过精心筛选以确保蛋白抽提效果良好的比较温和的非变性去垢剂(detergent)的缓冲液(含有130mM NaCl, 25mM Tris-Cl, pH7.5)，既确保了蛋白能被高效抽提，又能确保提取获得的蛋白样品中蛋白或酶的活性能被很好地保留，便于进行后续的蛋白活性分析检测或进一步的纯化。

由于本产品能确保提取的蛋白样品的活性，所含的去垢剂比较温和，虽然对于膜蛋白也有很好的抽提效果，但对于一些难溶性蛋白的抽提效率相对较低。如果希望获得比较高的难溶性蛋白的得率，建议使用含有强去垢剂的适当抽提试剂。对于使用本产品抽提获得的蛋白溶液，如果希望去除其中的去垢剂，可以通过透析或超滤方法去除。

本产品能够快速、温和、有效地抽提昆虫细胞或组织的总蛋白，抽提的蛋白能较好地保持其原有的空间结构和生物学活性，可用于多种生物化学和细胞生物学用途。例如，带有His、GST、HA、Flag、Myc、V5等标签蛋白的分离纯化，免疫印迹(Western blot)、免疫沉淀(Immunoprecipitation)、免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation)和ELISA (Enzyme linked immunosorbent assay)等常规生化分析，luciferase、β-gal、alkaline phosphatase、chloramphenicol acetyltransferase (CAT)等报告基因(Report gene)酶活性检测，PKA、PKC和酪氨酸激酶(tyrosine kinase)等蛋白激酶活力的检测等方面的用途。

使用本产品获得的蛋白样品可用碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0009/P0010/P0010S/P0011/P0012/P0012S)或Bradford蛋白浓度测定试剂盒(去垢剂兼容型) (P0006C)进行定量分析。

4℃保存，一年有效。室温保存，至少2周内有效。-20℃可以保存更长时间。

抽提蛋白样品的所有步骤都宜在冰上或4℃进行，以保证蛋白的活性。

可以根据需要在抽提试剂中添加适当的蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂等。例如总体效果比较理想的P1045/P1046 蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(通用型, 50X)，或者根据具体用途选择P1048/P1049 蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(通用型, 质谱兼容, 50X)，或成本比较低的蛋白酶抑制剂PMSF (100mM) (ST506)。如果无需检测磷酸化蛋白，也可以选不含磷酸酶抑制剂的蛋白酶抑制剂混合物。

可以考虑选购BeyoZonase™超级核酸酶(D7121/D7126)，并添加到本产品中以降低抽提产物的粘稠度。

抽提His标签重组蛋白如果后续用于镍柱等的纯化，通常应避免加入含EDTA的试剂。因为EDTA会破坏大多数的金属螯合纯化介质(例如Ni-NTA纯化介质)，但碧云天生产的His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) (P2210/P2218/P2220/P2226)可与EDTA兼容，因而在抽提试剂中含有EDTA仍然可用于含有His标签的蛋白纯化。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。