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碧云天研发的Avi标签蛋白生物素标记试剂盒(BirA法)（P0630）是一种通过生物素连接酶(BirA)对Avi标签融合蛋白或多肽快捷、高效地进行生物素标记的试剂盒。BirA可在ATP存在的条件下，高效活化生物素(D-Biotin)形成生物素酰-5’腺苷酸，并特异性地将生物素连接到Avi标签的赖氨酸残基上，从而对目的蛋白进行快捷、高效的生物素标记（图1）。
图1. 碧云天Avi标签蛋白生物素标记试剂盒(BirA法)的原理图。
产品特点：
▶ 本试剂盒中的生物素连接酶(BirA)来源于E.coli，纯度高，活性强，没有额外的标签，不影响生物素标记蛋白的后续检测和纯化；
▶ Avi标签小且对融合蛋白的影响非常小，只针对Avi标签上的Lys残基进行特定位置的生物素标记，生物素标记效率高，可重复性好；
▶ 体内或体外均可进行标记，标记后的蛋白与链霉亲和素的亲和力高，从而使Avi-tag技术可以应用于目的蛋白的固定吸附、纯化和检测等；
▶ 相比于传统生物素化学标记的非特异性位点的标记，BirA催化的反应条件更温和、更简单，对被标记蛋白活力影响小，酶活效率高，标记特异性强。
产品效果：
图2. 碧云天的Avi标签蛋白生物素标记试剂盒(BirA法)进行体外生物素标记Avi标签融合蛋白的效果图。
本试剂盒的蛋白(多肽)底物为带有Avi标签的融合蛋白或多肽，碧云天此前已推出过一系列Avi标签的原核/真核表达质粒，可在哺乳动物细胞和大肠杆菌中表达特定目的蛋白。印象不深的同学们再来跟小编一起回顾一下吧~
该系列产品利用Avi-tag技术，可分为真核表达载体和原核表达载体，分别适用于在哺乳动物细胞和大肠杆菌中表达特定目的蛋白。可在体内或体外高效完成对目的蛋白的生物素标记。
真核载体
| 质粒名称 | 抗性 | 产品特点 |
| pCMV-N-3X Flag-Avi-SUMOEU1-Neo | 氨苄青霉素抗性+新霉素抗性 | 含3X Flag tag、Avi tag及SUMOEU1 tag，SUMO标签可被相应蛋白酶特异性识别并切割 |
| pCMV-N-3X Flag-SUMOEU1-MCS-Avi | 氨苄青霉素抗性+新霉素抗性 | 含3X Flag tag、SUMOEU1 tag及Avi tag，SUMO标签可被相应蛋白酶特异性识别并切割 |
| pCMV-N-3X Flag-Avi-SUMOEU1-MCS-IRES-BirA | 氨苄青霉素抗性+新霉素抗性 | 共表达质粒，可实现含3X Flag tag、Avi tag及SUMOEU1 tag的目的蛋白和BirA的共表达 |
| pCMV-N-3X Flag-SUMOEU1-MCS-Avi-IRES-BirA | 氨苄青霉素抗性+新霉素抗性 | 共表达质粒，可实现含3X Falg tag、SUMOEU1 tag及Avi tag的目的蛋白和BirA的共表达 |
上述质粒含Flag标签，表达的目的蛋白可通过Anti-Flag磁珠(P2115/P2181)或Anti-Flag亲和凝胶(P2271/P2282)进行纯化。生物素标记蛋白可以通过碧云天的BeyoMag™ Streptavidin Magnetic Beads (链霉亲和素磁珠) (P2151)进行免疫沉淀，或者通过辣根过氧化物酶标记Streptavidin (A0303)和碱性磷酸酯酶标记Streptavidin (A0312)进行原位检测或免疫印迹检测。
原核载体
| 质粒名称 | 抗性 | 产品特点 |
| pET-N-His-Avi | 卡那霉素抗性 | His tag和Avi tag位于多克隆位点前 |
| pET-His-MCS-Avi | 氨苄青霉素抗性 | 多克隆位点位于His tag和Avi tag之间 |
| pET-N-Avi-His-SUMO3 | 氨苄青霉素抗性 | N端带有Avi tag、His tag以及SUMO3 tag，SUMO标签可被相应蛋白酶特异性识别并切割 |
| pET-N-His-SUMO3-Avi | 氨苄青霉素抗性 | N端带有His tag、SUMO3 tag以及Avi tag，SUMO标签可被相应蛋白酶特异性识别并切割 |
| pET-Dual-His-MCS-Avi-BirA | 氨苄青霉素抗性 | 共表达质粒，可在IPTG的诱导下高效启动目的蛋白和BirA的共表达，一组多克隆位点位于His tag和Avi tag之间；另一组表达带有S tag的BirA， |
| pET-Dual-Avi-His-SUMO3-MCS-BirA | 氨苄青霉素抗性 | 共表达质粒，可在IPTG的诱导下高效启动目的蛋白和BirA的共表达，一组His tag、Avi tag和SUMO3 tag位于多克隆位点前；另一组表达带有S tag的BirA |
| pET-Dual-His-SUMO3-Avi-MCS-BirA | 氨苄青霉素抗性 | 共表达质粒，可在IPTG的诱导下高效启动目的蛋白和BirA的共表达，一组His tag、SUMO3 tag和Avi tag位于多克隆位点前；另一组表达带有S tag的BirA |
上述质粒含His标签，表达的目的蛋白可以采用如BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) (P2210/P2218/P2220)、His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型) (P2226)以及BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) (P2233)、His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型) (P2229S)、BeyoMag™ Anti-His Magnetic Beads (Anti-His磁珠)（P2135）等进行纯化。
