品名:HT-29-EGFP细胞株
货号:CG016
包装:1×10^6~1×10^7 1支
细胞株类型:稳定表达EGFP多克隆细胞株
原始细胞:HT-29(人结肠癌细胞)
表达基因:EGFP
抗性:嘌呤霉素
培养基:MEM培养基+10%FBS,puromycin 1ug/ml
消化液:0.25%胰蛋白酶,0.53mM EDTA
冻存液:50%胎牛血清,40%MEM,10%DMSO
培养条件:37℃,5% CO2
产品简介:
HT-29-EGFP细胞稳定表达EGFP。该细胞株采用慢病毒载体pLV-EGFP-N(货号VL3211)构建,性状稳定。可用作对照细胞,也可用于活体动物成像实验。
细胞株构建方法:
慢病毒载体pLV-EGFP-N(货号VL3211)包装慢病毒后感染HT-29细胞,用嘌呤霉素筛选得到多克隆细胞株。
细胞传代:
- 传代前将细胞培养液、PBS和胰蛋白酶温浴到37℃。
- 吸去细胞培养液。
- 用PBS漂洗一次。
- 加入适量胰蛋白酶,轻轻晃动细胞瓶,使胰蛋白酶均匀覆盖细胞。吸去胰蛋白酶,将培养瓶放置在细胞培养箱中,37摄氏度消化。在倒置显微镜下观察,看到细胞分开及稍微变圆即可,过度消化可能导致细胞贴壁困难。
- 加入5ml 细胞培养基,用吸管轻柔吹打分散细胞。
- 按1:3到1:5接种细胞。