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植物总 RNA 提取试剂盒
FlashPure Plant Total RNA Mini Kit
目录号：91019
产品内容
产品成份 | 91019-50（50 次） |
裂解液 PRL | 50 ml |
糖酚去除剂 PAD | 5 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml（需加入指定量无水乙醇） |
RNase-Free H2O | 10 ml |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5ml 离心管 | 50 支 |
RNase-Free 2.0 ml 液氮研磨管 | 50 支 |
保存温度
室温（15 ~ 25℃）保存，有效期 12 个月。
产品简介
适用于提取绝大多数植物根、茎、叶、花的总RNA，RNA可直接用于RT， RT-PCR，RT-qPCR，RACE，普通转录组测序等。
本试剂盒是同类产品中适应性最广泛，不但可以提取小麦、玉米、水稻、大豆、番茄、烟草、拟南芥等简单植物，也可以提取茶树叶片、棉花叶片、葡萄叶片、杨树叶片、番薯叶片、花生叶片、香蕉叶片、荔枝叶片、白松叶片等多糖多酚含量一般的植物。
如果遇到果实、种子、中草药，例如：多糖多酚巨高的作物种子（小麦/玉米/大豆/水稻）、葡萄果实、蓝莓果实、百合鳞茎、土豆块茎；或者次级代谢产物巨丰富的葛根、虎杖、雪莲等药用植物，请选择R513-果实种子总RNA提取试剂盒。
产品特点
1. 无毒：免氯仿、免β-巯基乙醇！
2. 高质：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！
3. 高效：提取全过程仅需 20 分钟！
注意事项
a. 自备试剂：无水乙醇。
b. 提取过程使用 RNase-Free 的吸头；研钵用水彻底洗净，烘箱烘干即可；
c. 样品加入裂解液 PRL 匀浆后，可在–80℃保存一个月以上。
d. 取 RNA 样本时，把新鲜组织样本浸入 RNAsafe ( RNA 样品保存液， 91115-100 ) 中，可在 37℃保存一天，在 25℃保存一周，在 4℃保存一个月，在-20℃或者–80℃长期保存。
操作步骤
提示：所有离心步骤必须在室温（15 ~37℃）下进行。
第一次使用前，请先在漂洗液 RW 中加入无水乙醇，加入体积详见标签
1. 材料处理：
a．取 500 μl 裂解液 PRL，转入 1.5 ml 离心管中，再加入 50 μl 糖酚去除剂 PAD，混匀备用。
注意：对于幼嫩的农作物叶片等简单样本，不加糖酚去除剂 PAD，RNA
的产量可能会提高一些。
b．液氮中研磨适量植物组织成细粉，取≤50 mg 细粉转入上述装有裂解
液 PRL 的 1.5 ml 离心管中,剧烈涡旋震荡 30 sec，充分混匀。
（冬天气温低，37℃摇床振荡 3 min，可增强裂解效果，提高产量）
c． 将裂解物 13,000 rpm 离心 5-10 分钟，沉淀不能裂解的碎片。
注意：使用 1 ml 的裂解液 PRL 和 100 μl 糖酚去除剂去裂解 100 mg 样品，RNA 产量会翻倍。
2. 小心吸取上清（一般 480 μl，注意不要吸到沉淀）转入一个新的离心管中，加入 0.5 倍上清体积的无水乙醇（例如：480 μl 上清，加入 240 μl无水乙醇），此时可能出来沉淀，用移液器吹打混匀，不需要离心。
3. 转移上清混合液至 RNA 吸附柱中，13,000 rpm 离心 2 min，倒弃滤液。
注：吸附柱的容积为 750 μl，如果混合液超过此体积，请分两次上柱。
4. 加入700 μl 去蛋白液RW1，室温放置1min , 13,000 rpm离心30 sec，倒弃滤液。
5. 加入 500 μl 漂洗液 RW, 13,000 rpm 离心 30 sec，倒弃滤液。
6. 重复步骤 5。
7. 将 RNA 吸附柱放回空收集管中，13,000 rpm 离心 2 min，除去吸附膜上残留的乙醇。
8. 取出 RNA 吸附柱，放入 1.5 ml RNase-free 离心管中，向 RNA 吸附膜的中央悬空滴加 30~50 μl 的 RNase-free H2O，室温放置 1 min，13,000 rpm 离心 1 min。
9. 提取的 RNA 可直接用于下游实验，或于-70℃保存，避免 RNA 降解。
附录：
一、免液氮直接研磨（自动研磨仪）——适用于新鲜样本
a. 在2.0ml 液氮研磨管中加入4 mm两粒，加600μl裂解液 ARL，
放进20 mg左右的样本，设置65个频率，震荡2 min。
b. 将裂解物13,000 rpm 离心3 min，沉淀不能裂解的碎片。
二、液氮研磨（自动研磨仪）:
a. 把研磨模块丢到液氮中预冷，直到没有气泡冒出视为预冷完毕。
b. 在2.0 ml液氮研磨管中放入3mm 钢珠3粒，放进20-30mg样本，投入液氮中预冷。
c. 把预冷好的离心管插入研磨模块中，放进研磨仪，设置 55 个频率， 震荡 30~60 sec。（以北京赫得研磨仪——京 N9548 为例）
d. 研磨完成后，马上加600μl裂解液ARL，剧烈涡旋振荡,充分混匀。
e. 将裂解物 13,000 rpm 离心 3 min，沉淀不能裂解的碎片。
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