核糖核酸酶R(Ribonuclease R, RNase R)来源于大肠杆菌RNR超家族,是一种镁离子依赖性的3’-5’核糖核酸外切酶,可从3’-5’方向将RNA逐步切割成二核苷酸和三核苷酸。RNase R几乎能够消化所有线性的RNA,但不易消化环装RNA,套索结构RNA和3’端突出少于7个核苷酸的短双链RNA分子。
RNase R常用于基因表达和可变剪切研究,可消化线性RNA以富集环状RNA或套索结构RNA。
活性定义:One Unit converts 1 μg of poly-r(A) into acid-solube nucleotides in 10 minutes at 37℃ in 20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100mM KCl and 0.1 mM MgCl2.
浓度:20U/μL
纯度:不含DNase,不含其它RNA内切酶和外切酶活性。
酶储存溶液:50mM Tris-HCl (pH7.5 @25℃), 200mM NaCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% (v/v) Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100.
10* Reaction Buffer: 200mM Tris-HCl (pH8.0 @25℃), 1M KCl, 1mM MgCl2.
失活或抑制:70℃加热10分钟可使RNase R失活。
运输与保存方法:-20℃保存,干冰运输。
注意事项:
- RNase R需要适当的镁离子浓度(0.1-1.0 mM)才能发挥活性。因此,反应体系中存在EDTA等可以螯合镁离子的螯合剂时,会显著降低RNase R活性。必要时需额外添加MgCl2使反应体系中游离的镁离子浓度至少达到0.1mM以上,以确保螯合剂不会螯合镁离子而影响酶活性。
- 本产品仅限用于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。