基本步骤:将载体在克隆位点进行全质粒扩增,得到线性化载体;设计同源引物,使得目的片段 PCR 产物的 5’和 3’末端分别带有和预插入的线性化载体前后两末端完全一致的序列 (15 bp ~ 20 bp);将扩增好的目的基因 PCR 产物和线性化载体按一定比例混合后,在 UvsXase 的催化下,仅需反应 30 min 即可进行转化,完成定向克隆。克隆阳性率可达 95%以上。
产品应用 -快速克隆 -无缝克隆 -高通量克隆 -DNA 定点突变
产品组成
组分 | C102 ( 10 rxns ) | C102 ( 25 rxns ) | C102 ( 50 rxns ) |
UvsXase® Multi | 20 μl | 50 μl | 100 μl |
5 × UFO Multi Buffer | 40 μl | 100 μl | 200 μl |
储存条件 -20℃保存,于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
实验流程图
实验方案