实验记录:
紫外分光光度计 | 浓度ng/ul | 260/280 |
人血样本 | 352.3 | 1.81 |
人血样本 | 389.4 | 1.83 |
人血样本 | 451.2 | 1.91 |
人血样本 | 396.5 | 1.85 |
动物血样本 | 256.2 | 1.81 |
动物血样本 | 246.8 | 1.79 |
动物血样本 | 278.1 | 1.85 |
动物血样本 | 272.6 | 1.81 |
【产品名称】
磁珠法血液基因组DNA快速提取试剂盒
【包装规格】
50 tests / 盒
【产品简介】
本试剂盒使用便捷,采用磁珠纯化,整个抽提过程最快约需12分钟。一方面,本试剂盒优化了裂解液成分,
仅2-5分钟就能完成裂解步骤;另一方面,优化了抽提体系,使用特定的缓冲液系统搭配特定的磁珠,可
以从血液中分离纯化出高纯度的基因组DNA。使用本产品纯化的DNA,片段完整、纯度高、质量稳定可靠,
可直接用于下游各种检测试验,包括酶切、PCR、荧光定量PCR、文库构建、Southern杂交、芯片检测、高
通量测序等实验。
【试剂盒组成】
表1 试剂组成成分
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
裂解液 | 25mL | 常温 |
洗涤液1 | 35mL | 常温 |
洗涤液2 | 19mL(第一次使用前加入56ml无水乙醇,混匀) | 常温 |
磁珠悬浮液 | 1.5mL | 常温 |
洗脱液 | 5mL | 常温 |
【储存条件及有效期】
储存条件:常温。
运输条件:常温。
有效期:24个月。
【手工提取】
使用前请先在洗涤液2中加入无水乙醇
1.取2mL离心管,打开管盖,加入500μL裂解液、30μL磁珠(使用前混匀磁珠)、20-500μL血液样本,盖上管盖,充分涡旋混匀10-30s,56℃孵育3min。
注:本试剂盒可从20-500μL血液中提取基因组DNA,推荐血液用量200μL。
2.瞬离,上磁力架,吸磁90s,打开管盖去除废液。
3.取下离心管,加入700μL洗涤液1,盖上管盖,涡旋30s,上磁力架,吸磁60s,打开管盖去除废液。
4取下离心管,加入700μL洗涤液2,盖上管盖,涡旋30s,上磁力架,吸磁60s,打开管盖去除废液。
5.瞬离,上磁力架,去除管底残留液体,室温静置3min。
6.加入100μL洗脱液,盖上管盖,充分涡旋混匀10-30s,75℃孵育2-5min,上磁力架吸磁2min,取上清转移到新的离心管中,用于下游检测。
注:如不马上使用,建议-20℃保存。
【上机提取】
1.使用前检查预分装板是否有漏液破损等现象,如果有则禁止使用。
2.将试剂平放于桌面,撕封口膜时避免振动,防止液体溅出。在孔板孔位 1 中加入 200μL 样本,将孔板放入核酸提取仪中,装上磁棒套,确认磁棒套安装到位,注意交叉污染。
3.按照表2在96孔板中加样。
4.按照表3运行程序。
表2 试剂组成成分
试剂名称 | 孔位 | 体积 |
裂解液 | 1/7 | 500μL |
磁珠悬浮液 | 2/8 | 400μL(370μL磁珠保存液+30μL磁珠原液) |
洗涤液1 | 3/9 | 700μL |
洗涤液2 | 4/10 | 700μL |
洗脱液 | 6/12 | 100μL |
表3 上机程序
步骤 | 孔位 | 混合时间 | 磁吸时间 | 等待时间 | 体积 | 混合速度 | 温度 |
1 | 2 | 30s | 1min | 0 | 400μL | 快 | 0 |
2 | 1 | 3min | 1min | 0 | 600μL | 中 | 56℃ |
3 | 3 | 1min | 1min | 0 | 700μL | 快 | 0 |
4 | 4 | 1min | 1min | 2min | 700μL | 快 | 0 |
5 | 6 | 3min | 2min | 0 | 100μL | 快 | 75℃ |
6 | 2 | 30s | 0 | 0 | 400μL | 快 | 0 |
注:如不马上使用,建议-20℃保存。