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T7 核酸外切酶

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更新 2025-08-12 15:42

T7 核酸外切酶

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♦ 5' →3' 核酸外切酶 ♦ 切下 DNA 的 5' 单核苷酸

概述 本酶作用于双链 DNA,沿 5´→3´方向催化去除 5´单核苷酸,它既能从 5´末端起始消化,也能从双链 DNA 的切刻或缺口处起始消化(1) 。它既能降解 5´磷酸化DNA也能降解5´去磷酸化 DNA。据报道,它能沿 5´→3´方向降解 RNA/DNA 杂交双链上的 RNA 或 DNA,但不能降解双链或单链 RNA(2) 。该酶是 T7 噬菌体基因 6 的产物。

来源 纯化自含 TYB12 内含肽融合子的 E. coli 菌株。

反应条件 1X NEBuffer 4 [50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2  , 1 mM DTT (pH 7.9)]。25°C 温育。

质保声明 无核酸内切酶和外切酶污染。

单位定义 1 单位指在 50 μl 反应体系中,25°C 条件下,30 分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 1 nmol 的酸溶性脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。

活性检测条件 1X NEBuffer 4 和 0.15 mM 超声波破碎的双链 [3 H]-DNA。

浓度 10,000 units/ml。

贮存条件 10 mM Tris-HCl (pH 8.0),0.1 mM EDTA,,5 mM DTT 和 50% 甘油。于-20°C 贮存。

热失活 无。

参考文献 (1) Kerr, C. and Sadowski, P.D. (1972) J. Biol. Chem ., 247, 305–318.
(2) Shinozaki, K. and Okazaki, T. (1978) Nucl. Acids Res ., 5, 4245–4261.

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