■ 转录反应后 DNA 模板的降解
■ 除去 RNA 样品中污染的基因组 DNA
■ DNase I 印迹分析法
■ 切刻翻译
| 概述 DNase I (RNase-Free)是一种非特异性核酸内切酶，切割DNA产生具有3´羟基和5´磷酸末端的二、三和寡核苷酸产物(1,2)。DNase I 可作用于单链、双链-DNA、染色质和RNA：DNA杂交体。
| 来源 重组 E. coli 菌珠，含有牛胰腺 DNase I 的 MBP 融合克隆。
| 反应条件 1X DNase I 反应缓冲液, [10 mM Tris-HCl (pH 7.6 @25°C), 2.5 mM MgCl2 , 0.5 mM CaCl2 ]。37°C温育。
| 质保声明 无核糖核酸酶污染。
| 单位定义 1 单位指在 50 μl DNase I 反应缓冲液中，37°C 10 分钟条件下，完全降解 1 μg pBR322 DNA 所需要的酶量。 完全降解是指绝大多数的 DNA 片段减少成为四核苷酸或更短。
| 浓度 2,000 units/ml。
| 贮存条件 10 mM Tris-HCl (pH 7.6), 2 mM CaCl2 和 50% 甘油。-20°C 储存。
| 热失活 75°C 10分钟。
| 注意事项 应添加终浓度为 5 mM 的 EDTA，以避免 RNA 在酶失活过程中被降解(3) 。
| 参考文献 (1) Kunitz, M. (1950) J. Gen. Physiol ., 33, 349–362.
(2) Vanecko, S. and Laskowski, M. (1961) J. Biol. Chem ., 236, 3312–3316.
(3) Huang, Z. (1996) Biotechniques , 20, 1012–1020.
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