一般描述:胶原酶D是通过过滤、硫酸铵沉淀、透析和冻干而从溶组织梭菌的培养物中制备的。
特异性:胶原酶可降解天然胶原蛋白。梭菌蛋白酶、胰蛋白酶样酶和中性蛋白酶也会降解其他蛋白质。
应用:来自溶组织梭菌的胶原酶被广泛用于解聚多种类型的组织(如:肺、心脏、肌肉、骨骼、脂肪组织、肝脏、肾脏、软骨、乳腺、胎盘、血管、脑、肿瘤)，以及用于建立原代细胞培养系统的单细胞悬浮液的制备。当细胞表面蛋白的功能性和完整性很重要时，推荐使用胶原酶D。来自Roche的梭菌胶原酶已用于从多种类型的组织中进行细胞的制备，如肝细胞、脂肪细胞、胰岛、上皮细胞、肌肉细胞、内皮细胞等。然而，应根据经验确定每个批次的酶对破坏特定组织的适用性。
特点和优势
内含物:冻干粉，未灭菌单位定义:来自Roche的胶原酶以Wünsch单位(在+25°C下每分钟用Wünsch底物形成μmol的产物)进行测定。通常，胶原酶活性是以Mandl单位(在+37℃下5小时内从胶原释放的1μmol亮氨酸)给出的。不幸的是，两个活性单位之间没有统一的转换因子，因为Mandl单位部分取决于胶原酶制剂中污染性蛋白酶的浓度，而这是一个不确定的变量。较纯的胶原酶制剂相对于粗制剂在Mandl单位中实际上具有更低的比活性。梭菌制剂通常具有约1:1800的转换因子(如某个特定批次的梭菌胶原酶所含有的约0.15 Wünsch U/mg和250 Mandl U/mg)。
外形:冻干粉，未灭菌。
制备说明
激活剂:Ca2+工作浓度:0.5-2.5mg/ml
储存条件(工作溶液):-15至-25°C，Roche建议仅重悬需要立即使用的冻干粉的量。重新配制的溶液可以在-15至-25℃下储存长达一周。因为重新配制后活性降低了，所以要避免反复冻融。
抑制剂：
胶原酶抑制剂:EDTA，EGTA，Cys，His，DTT，BME
胶原酶不会被血清所抑制。
梭菌蛋白酶抑制剂:TLCK
胰蛋白酶抑制剂:抑肽酶，胰蛋白酶抑制剂(蛋清，大豆)
酶活:
胶原酶活性:>0.15 U/mg(基于Wünsch)(+25°C，4-苯基-偶氮苄基-氧基羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作为底物)
污染性酶活:胰蛋白酶，梭菌蛋白酶和总蛋白水解活性
胶原酶D具有正常至高的胶原酶活性，以及非常低的胰蛋白酶活性(通常<0.2单位/mg，BAEE作为底物)。
重悬:在任何平衡盐溶液中重悬(如HBSS)
其他说明:仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
同行评审论文(部分文献)
Functional xenobiotic metabolism and efflux transporters in trout hepatocyte spheroid cultures.Chibuzor Uchea et al.Toxicology research, 4(2), 494-507 (2015-04-22)Prediction of xenobiotic fate in fish is important for the regulatory assessment of chemicals under current legislation. Trout hepatocyte spheroids are a promisingIsolation of Infiltrating Leukocytes from Mouse Skin Using Enzymatic Digest and Gradient Separation.Charles J Benck et al.Journal of visualized experiments : JoVE, (107)(107), e53638-e53638 (2016-02-11)Dissociating murine skin into a single cell suspension is essential for downstream cellular analysis such as the characterization of infiltrating immune cells in rodent models of skin inflammation. Here, we describe a protocol for the digestion of mouse skin inLow intraprostatic DHT promotes the infiltration of CD8+ T cells in BPH tissues via modulation of CCL5 secretion.Yu Fan et al.Mediators of inflammation, 2014, 397815-397815 (2014-05-09)Clinical studies suggested thatandrogen might be associated with infiltrating T cells in prostate of benign prostatic hyperplasia (BPH) patients, but detail of T-cell subset and mechanism still remained unclear. The present study tested the hypothesis that intraprostatic 5 α -dihydrotestosteroneEndothelial AMPKα1/PRKAA1 exacerbates inflammation in HFD-fed mice.Qiuhua Yang et al.British journal of pharmacology, 179(8), 1661-1678 (2021-11-20)Excess nutrient-induced endothelial cell inflammation is a hallmark of high fat diet (HFD)-induced metabolic syndrome. Pharmacological activation of the protein kinase AMP-activated α1 (PRKAA1) also known as AMPKα1, shows its beneficial effects in many studies of cardiometabolic disorders. However, AMPKα1Promoting antigen escape from dendritic cell endosomes potentiates anti-tumoral immunity.Jean-Pierre Bikorimana et al.Cell reports. Medicine, 3(3), 100534-100534 (2022-05-03)The cross-presenting capacity of dendritic cells (DCs) can be limited by non-specific degradation during endosome maturation. To bypass this limitation, we present in this study a new Accum-based formulation designed to promote endosome-to-cytosol escape. Treatment of primary DCs with Accum一、╳※试剂※╳:常规血清优势供应:VivaCell货号C04001-500血清、Gemini货号900-108血清、Gemini货号100-512血清、Gibco血清(10099-141澳洲血清、10270-106南美血清、16000-044血清)、BI血清BI货号04-001-1ACS、Sigma货号F8318-500ml澳洲胎牛血清、Sigma货号F8687澳洲胎牛血清、Sigma货号F2442-500ml特级胎牛血清、ScienCell货号0500澳洲胎牛血清、Cegrogen货号A0500-3010胎牛血清、Cegrogen货号B0500-5010新生牛血清、康源血清培养基(包括无血清)、冻存液(包括无血清)，包括:友康YoconMerck(Millipore/Sigma/Roche/KaPa)正式授权代理、博奥龙Biodragon独家总代理、EFL独家总代理、碧云天Beyotime代理☆☆☆☆☆☆Beckman货号A63881纯化磁珠Agencourt AMPure XP(60ml/瓶)/A63882(450ml/瓶)；Beckman货号B23317核酸片段筛选试剂盒Agencourt SPRIselect(5ml/瓶)分子类:Biotium货号41003的GelRed染料、货号31000的EvaGreen染料、Zymo Research、Qiagen饲料类:Research Diets、Dyets二、╳※耗材※╳: 洁特JET耗材(各类常规用实验耗材)、赛普Cellpro耗材/KirGen耗材、博麦迪(常规的)各类试剂瓶 Bioplastics Thermo Fisher Scientific的很多产品线，包括旗下的: 一、Nunc耗材 二、QSP耗材(各类吸头/滤芯吸头、离心管、PCR管等) 三、Nalgene耗材仪器 四、FisherBrand耗材仪器(含各类盖玻片载玻片等) 五、Lab_Serv耗材仪器 六、Finnpipette移液器(如：F1系列、F2系列、F3系列等等各类型号的移液器) 七、Abgene耗材畅销款:我们是常备有大量现货的※╳√√✓✔√✓✔√✓✔上海睿安生物科技有限公司成立于2009年，专注于为生命科学和生物技术领域的客户提供优质的产品与服务。代理了多家欧美知名品牌，如美国Thermo Fisher耗材(包括旗下Nunc、QSP、Nalgene、FisherBrand、Lab_Serv耗材仪器、Finnpipette移液器、Abgene耗材，等等)、默克Merck-Millipore/Sigma/Roche/KaPa、Zymo Research、洁特JET耗材(各类常规用实验耗材)、赛普Cellpro耗材、博奥龙Biodragon独家总代理、EFL独家总代理、碧云天Beyotime代理、Eppendorf、友康Yocon、Research Diets高脂饲料，IBL、BioVendor、Mercodia、ShiBayaji代谢类产品、Axygen-Corning长期大量耗材备货、BioCoat畅销款长期备货，VivaCell血清、Gemini血清、Gibco血清，BI血清现货、ScienCell血清、Sigma血清、Moregate血清、Cegrogen血清、Pierce发光试剂、Fermentas、Invitrogen、Abcam、CST、BD、SAB、R&D systems、Beckman、Qiagen、BD Pharmingen、Biolegend、Jackson、Miltenyi、MP Biomedicals、Biotium更好的荧光试剂产品等品牌。睿安生物始终将“提供更好的产品和服务”作为企业发展的目标和努力的方向，并将通过优质的售前与售后服务，始终如一地为客户提供高质量的产品和服务，我们也希望能得到相关领域中更多老师和同仁们的指导和鞭策，为共创优秀品牌而努力奋斗！询订╳直线13611631389微信号 
