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试剂盒组分
• 辣根过氧化酶 (Activated HRP)，1 管（瓶） 冻干粉
• 反应启动液 (Modifier Reagent)，1 管
• 反应终止液 (Quencher Reagent)，1 管
• 产物保护液 (Protection Reagent)，1 管
储存条件
该试剂盒在低温下运输，收到后请置于-20°C 保存，保存时间 1 年。
操作步骤
1. 从-20°C 中取出 HRP 标记试剂盒，室温条件下平衡 30 分钟，使反应启动液和反应终止液充分解冻后混匀。
2. 向每 10 μl 待标记的抗体或其它蛋白分子溶液中加入 1 μl 反应启动液，用移液枪反复吹打几次以充分混匀，避免产生气
泡。
3. 打开辣根过氧化酶管（瓶）盖，将上述已启动的抗体或其它蛋白溶液直接加到该管（瓶）中，用移液枪反复吹打几次以
充分混匀，避免产生气泡，室温放置 3 小时。
4. 向辣根过氧化酶反应管（瓶）中加入反应终止液，比例为每 10 μl 抗体或其它蛋白溶液加入 1 μl 反应终止液，充分混匀，
室温放置 1 小时。
5. 终止完成后，加入等体积的产物保护液，充分混匀，置于-20°C 保存。（当待标记抗体或其它蛋白溶液中已含有 50%甘油
时，不需此步）
注意事项
1. 待标记的抗体，其效价应该在 1:20 以上。
2. 抗体缓冲液：以 0.01M pH7.4 PBS 为佳，最好不含有甘油、叠氮钠、氨基物质（包括甘氨酸、Tris 等）。但是，少量的氨
基物质（<0.05M）和少量的叠氮钠（<0.02%）对标记结果不会产生严重影响。如果待标记抗体含有高于以上浓度的物质，
需用 0.01M pH7.4 PBS 缓冲溶液进行充分透析。
3. 抗体用量：浓度应在 0.5 - 5 mg/ml 之间。具体用量参照下表：
表 1．相应抗体或其它蛋白分子标记量及体积关系
产品编号 HRP 量 抗体量 反应最佳体积
KHP-200U 200 μg 200 - 800 μg 200 μl
KHP-500U 500 μg 500 - 2000 μg 500 μl
KHP-1000U 1000 μg 1000 - 4000 μg 1000 μl
KHP-5000U 5000 μg 5000 - 20000 μg 5000 μl
注：抗体用量可以根据实验需要进行调整。在相应的 HRP 用量范围内，抗体量越少，HRP 标记效率越充分。
4. 本产品也可以用于带有氨基基团的蛋白质连接，其具体用量根据试验需要进行适当调整。
