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利用流式细胞术实现快速筛选
获取分离原代血细胞释放的 EV
对于特定的血细胞类型或其亚群，需要采用可靠且高效的方法分离出单个细胞群体，然后再对其释放的EV进行蛋白表达谱分析。
MACS磁珠是一种理想的解决方案，甚至可以直接从全血中富集不同的细胞类型。分离获得的细胞可立即进行培养，然后使用MACSplex外泌体试剂盒直接对释放到培养基中的EV进行分析。
图5显示了从分离获得的免疫细胞中释放的EV的蛋白表达谱。特定类型的细胞表面表达的许多标志物也存在于这些细胞释放的EV上。因此，可以使用EV标志物表达谱确定其来源。表2概括了用于EV分析的抗体。
MACSPlex外泌体试剂盒——全面的分析方案
由于EV体积较小，难以利用标准的流式细胞术进行分析，阻碍了该领域的发展。为了便于全面分析EV，美天旎研发出MACSPlex外泌体试剂盒 (MACSPlex Exosome Kit)。这款新型工具能够快速轻松地筛选出EV表面蛋白。
- 独特的多重磁珠平台，可利用流式细胞术进行EV的蛋白表达谱分析
- 可同时筛选37种表面标志物，有助于节省宝贵的样本材料
- 可对细胞培养上清或体液中的EV进行分析
MACSPlex外泌体试剂盒可同时检测已知存在于不同EV上的37种表位。该试剂盒使用了多种不同荧光标记的磁珠群体，这些
MACSPlex外泌体捕获磁珠（MACSPlex Exosome Capture Beads）可通过流式细胞术来区分。
MACSPlex外泌体捕获磁珠群体中的每个磁珠均可与特异性抗体偶联，这些抗体分别结合于不同的外泌体表位。使用MACSPlex外泌体检测试剂（MACSPlex Exosome Detection Reagents）—即APC偶联的四次跨膜蛋白CD9、CD63和CD81抗体混合物，对与MACSPlex捕获磁珠结合的外泌体进行染色。形成的复合物包含 i) MACSPlex外泌体捕获磁珠、ii) 外泌体和 iii) APC偶联抗体(图2)。然后根据MACSPlex外泌体捕获磁珠和APC偶联抗体的荧光特性对这些复合物进行分析 (图3)。该试剂盒中还包含两种同型对照磁珠，用于检查非特异性结合。在MACSQuant®流式分析仪上使用Express模式即可轻松进行分析。Express模式简化了实验设置、执行和分析步骤，即便是缺乏流式细胞术经验的用户也可以进行复杂的外泌体分析。
