【产品简介】
我公司生产的Western一抗二抗去除液(Stripping buffer),用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了目的蛋白的化学发光检测后,有时还需要检测其它蛋白的检测。通过使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜,通常会导致蛋白信号的减弱。本Western一抗二抗去除液,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5次。使用本试剂只需大约20-30分钟即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western操作。
【使用方法】
曝光后的膜使用PBST或者TBST清洗曝光液后。加入膜再生液,覆盖住膜,在摇床上100-200转/分钟进行摇动,10分钟后更换膜再生液,共三次。或者根据蛋白曝光情况,在摇床上100-200转/分钟连续摇动,20-30分钟。
【保存】
2~8°C保存,一年有效。长时间不使用可以-20℃保存。
【注意事项】
使用辣根过氧化物酶(HRP),任何一次封闭(blocking)都应当使用5%-10%脱脂牛奶,如果使用碱性磷酸酯酶,任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。
本产品在4℃或-20℃保存时,会呈现浅黄至淡粉色,室温放置一段时间后会逐渐转变为无色,再次低温保存时又会逐渐转变为浅黄至淡粉色。该颜色变化为本产品的正常现象,经检测有无颜色的本产品使用效果完全一致。
为取得最佳效果,推荐使用PVDF膜。但NC膜也可以使用本Western一抗二抗去除液。
使用ECL、BeyoECL等类似的化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测,例如DAB,NBT/BCIP,不适用于本试剂。
本Western一抗二抗去除液有轻微腐蚀性,使用时请注意防护。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。