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Ca2+/钙调素依赖型蛋白激酶II Ca2+/Calmodu

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北京美科美生物技术开发有限公司
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更新 2025-08-12 15:57

Ca2+/钙调素依赖型蛋白激酶II Ca2+/Calmodu

货号# 规格 价格 库存
#P6060S 5,000 units 1,329.00 元
#P6060L 25,000 units 5,299.00 元

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♦蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶
♦鼠源,重组蛋白(草地夜蛾,又称秋粘虫Spodoptera frugiperda Sf9细胞)

分子量

36 kDa,但SDS-PAGE表观分子量是33 kDa。
质保声明 无蛋白酶和磷酸酶活性。 热失活 65°C,20分钟。

概述

Ca2+/钙调素依赖型蛋白激酶II (CaMKII)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。它依赖于Ca2+/钙调素,是α亚基单体的截短型(包括1-325氨基酸残基)。在有Ca2+和钙调素存在时,位于286位的苏氨酸发生自身磷酸化,活化CaMKII,并产生不依赖Ca2+/钙调素的生物活性(1,2)。

影响识别因素

CaMKII磷酸化反应的最小识别功能域为RXXS/T。最近的报道显示,促使磷酸化反应的位点除了-3R外还有-5、-2和+1位。因此,CaMKII优先磷酸化的位点依次为含HydXRXXS/T和HydXRNBXS/T功能域的底物,其中Hyd代表疏水,X代表任一氨基酸,NB代表非碱性氨基酸残基(3)。

反应条件

磷酸化底物之前,需要先活化CaMKII,即在有CaCl2和钙调素存在的条件下,用ATP/Mg2+使CaMKII自身磷酸化。之后,外源底物的磷酸化便不再需要CaCl2和钙调素。
用CaMKII磷酸化 1. 活化CaMKII:
在添加有100 μM ATP,1.2 μM 钙调素和2 mM CaCl2的1X CaMKII反应缓冲液中稀释所需CaMKII。30°C条件下温育10分钟。随后的外源底物磷酸化都不需要CaCl2和钙调素的参与。
2. 底物磷酸化:
混和底物和1X CaMKII反应缓冲液,加入100 μMATP和终比活性为100-500 μCi/μmol的γ-放射性标记的ATP,再加入活化了的CaMKII,30°C温育。
反应缓冲液(随酶提供) 10X CaMKII反应缓冲液
10X CaCl2 (20 mM)
10X 钙调素 (12 μM)
50X ATP (10 mM)
比活性 ~5,000,000 units/mg。

来源 来自感染有重组杆状病毒(baculovirus)的草地夜蛾(又称秋粘虫Spodoptera frugiperda)Sf9细胞,携带有大鼠CaMKII截短型基因(Dr. H. Shulman惠赠)。
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注册资本未填写 公司注册时间2008年
公司所在地 企业类型企业单位 ()
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