产品属性 | |
组成 | 表面连接有 Ni2+ 的磁性微球 |
磁力大小 | ~60 EMU/g |
磁化类型 | 超顺磁性 |
有效密度 | 2.5 g/ml |
浓度 | 100 mg/ml (1% NiSO4·6H2O ) |
结合能力 | >2mg His-标签 GFP /ml 磁珠 |
储存方式 | 常温运输,收到后于4°C保存 |
操作流程
使用我们的磁珠进行蛋白纯化操作非常简单方便。
1. 将磁珠与细胞裂解物混合,在混合过程中保持磁珠悬浮于样品溶液中,使目标蛋白与被固定的配体充分结合。
2. 连续旋转孵育充足时间。
3. 孵育后收集磁珠,并使用磁力分离器将磁珠从样品中分离。
4. 使用含咪唑的洗脱缓冲液,洗脱纯化后的His标签重组蛋白。
优势及特点
· 快捷、简单的一步法高通量操作流程,无需纯化柱或过滤器,以及重复移液、离心等操作。
· 稳定的共价键,极少的配体泄漏
· 极强的蛋白结合能力,非常低的非特异性结合率
· 可根据实验条件对样品体积进行调整,便于自动化操作
· 产品重复效果好
产品应用
· 从粗细胞裂解液中,有效筛选出标签蛋白
· 标签蛋白的微量纯化
· 研究蛋白质结构和功能
· X射线晶体学的重组蛋白的制备
· 研究蛋白之间、蛋白质与DNA的相互作用的重组蛋白的制备
背景
多聚组氨酸标签(6xHis标签)和His标签,是从各种表达系统(包括细菌、酵母、植物细胞和哺乳动物细胞系统)中纯化重组蛋白的常用工具。该标签是位于重组蛋白N或C末端的包含六个或更多个连续组氨酸残基。由于这种氨基酸链体积非常小,His标签具有几个独特的特性,包括较少的免疫原性、亲水性以及在天然和变性条件下均能发挥作用的用途广泛性。此外,由于其不会干扰融合蛋白的结构与功能,因此无需从重组蛋白上切割该标签。His标签的纯化原理基于固定化金属离子亲和层析(IMAC)。
固定化金属离子亲和层析(IMAC)是一种快速亲和纯化层析技术,是直接捕获和纯化 带标签重组蛋白的高性价比理想工具。IMAC基于携带his标签的重组蛋白对Ni2+或Co2+的亲和力从而达到分离目的,而Ni2+或Co2+则被结合固定到固相基质表面,例如珠状琼脂糖或纯化柱。在pH 7-8时,His标签蛋白将与Ni2+或Co2+结合。His标签重组蛋白的结合反应受到各种自变量的影响,如pH、温度、盐类型、盐浓度、固定化的金属和配体密度以及蛋白质大小。可通过降低pH梯度、增加咪唑浓度或在缓冲液中加入EDTA螯合剂来洗脱结合的蛋白质。
尽管IMAC是一种非常有效的蛋白纯化技术,但这种技术主要用于传统的亲和层析基质,如琼脂糖树脂或纯化柱。使用这些固体基质进行纯化的过程非常繁琐、耗时,且无法处理体积非常微小的样品,也难以适应自动化系统。因此,Bioclone研发出了一种非常有效的磁珠IMAC分离产品以克服这些困难。
重组蛋白纯化系列 (询价有优惠) | |||
货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
MG101 | BcMag™ GST-标签蛋白纯化试剂盒 | 2ml Beads Kit | 4425 |
MG102 | BcMag™ GST-标签蛋白纯化磁珠 | 5 ml | 5925 |
MG103 | BcMag™ GST-标签蛋白纯化磁珠 | 10 ml | 8250 |
MHN101 | BcMag™ IDA-Ni His-标签蛋白纯化试剂盒 | 5 ml | 5250 |
MHN102 | BcMag™ IDA-Ni His-标签蛋白纯化试剂盒 | 10 ml | 9000 |
MHN103 | BcMag™ IDA-Ni His-标签蛋白纯化试剂盒 | 50 ml | 37500 |
MHO101 | BcMag™ IDA-Co His-标签蛋白纯化试剂盒 | 5 ml | 5250 |
MHO102 | BcMag™ IDA-Co His-标签蛋白纯化试剂盒 | 10 ml | 9000 |
MHO103 | BcMag™ IDA-Co His-标签蛋白纯化试剂盒 | 50 ml | 37500 |
MHP101 | BcMag™ 分泌型 His-标签蛋白纯化试剂盒 | 5 ml | 5250 |
MHP102 | BcMag™ 分泌型 His-标签蛋白纯化试剂盒 | 10 ml | 9000 |
MHQ101 | BcMag™ 低表达量 His-标签蛋白纯化试剂盒 | 5 ml | 5250 |
MHQ102 | BcMag™ 低表达量 His-标签蛋白纯化试剂盒 | 10 ml | 9000 |