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LabAssay™ LDL-胆固醇
LabAssay™ LDL-Cholesterol
胆固醇（Cholesterol）以脂蛋白的微粒形式在体内循环。脂蛋白种类多样，其中，由LDL（低密度脂蛋白）携带的胆固醇被称为LDL-胆固醇。
LDL将肝脏产生的胆固醇运往全身。当血液中的LDL含量高时，会在血管壁上沉积，引起动脉硬化，导致心肌梗塞或脑梗塞。人体内的LDL-胆固醇正常范围为140 mg/dL以下，超过140 mg/dL则会被视为高LDL-胆固醇血症。
本产品可检测血液（血清/血浆）中的LDL-胆固醇。通过使用微孔板可快速简便地检测样品中的LDL-胆固醇，且无需离心分离脂蛋白。
※LabAssay™ 系列产品仅供实验研究用，不能用于临床诊断。
◆试剂盒性能
| 物种 | 人、小鼠、大鼠 |
| 样品 | 血清、血浆 |
| 标准曲线范围 | 9.38-300 mg/dL |
| 所需样品量 | 5 μL |
| 检测时间 | 20 min |
| 检测法 | 显色法 (主波长 600 nm/副波长 700 nm) |
◆标准曲线示例
◆原理
第一反应阶段（清除非LDL胆固醇）
前处理液中的亲水基和疏水基可保护样品中的LDL免受胆固醇氧化酶（CO）和胆固醇酯酶（CHE）的影响。此外，LDL以外的脂蛋白，如乳糜微粒（CM）、极低密度脂蛋白（VLDL）和高密度脂蛋白（LDL）中的胆固醇（非LDL胆固醇）会在CO和CHE的作用下分解为脂肪酸和Δ4- 胆甾烯酮，同时生成过氧化氢。而生成的过氧化氢会在过氧化氢酶的作用下被分解为水。
第二反应阶段（LDL-胆固醇显色）
反应试剂发挥作用时，LDL中的胆固醇在CO和CHE的作用下生成过氧化氢。生成的过氧化氢在在过氧化物酶（POD）的作用下会使N-（3-硫代丙基）-3-甲氧基-5-甲基苯胺（HMMPS）和4-氨基安替比林发生定量氧化缩合，生成一种蓝色色素。通过检测这种蓝色的吸光度，可确定样品中的LDL-胆固醇浓度。
◆数据
精确度测试（批内差异）
使用本产品分别对人、小鼠、大鼠的2种浓度血清样品进行5次重复检测，确认精确度。
n＼ID | 人 | 小鼠 | 大鼠 | |||
ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | |
1 | 160 | 46 | 141 | 48.3 | 119 | 33.3 |
2 | 156 | 43.8 | 138 | 47.9 | 114 | 34.1 |
3 | 158 | 44.7 | 138 | 49.5 | 119 | 33.3 |
4 | 166 | 44.5 | 139 | 48.5 | 112 | 34.9 |
5 | 159 | 45.7 | 136 | 50.6 | 113 | 33.3 |
平均值 | 160 | 44.9 | 138 | 49 | 115 | 33.8 |
SD | 3.8 | 0.9 | 1.8 | 1.1 | 3.4 | 0.72 |
CV(%) | 2.4 | 2 | 1.3 | 2.2 | 2.9 | 2.1 |
【结果】
人血清的CV（%）为2.0-2.4％，小鼠血清的CV（%）为1.3-2.2％，大鼠血清的CV（%）为2.1-2.9％，结果良好。
再现性测试（批间差异）
使用本产品在4天内分别对3种不同浓度的人、小鼠、大鼠血清样品进行3次重复检测。
Day＼ID | 人 | 小鼠 | 大鼠 | ||||||
ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID3 (mg/dL) | ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID3 (mg/dL) | ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID3 (mg/dL) | |
1 | 125 | 88.1 | 41.8 | 119 | 91.4 | 48.4 | 130 | 78.7 | 45.2 |
2 | 124 | 87 | 41.1 | 119 | 88.1 | 45 | 129 | 76.1 | 42.9 |
3 | 130 | 91.5 | 41.7 | 118 | 88 | 48.2 | 126 | 74.2 | 49.7 |
4 | 125 | 89.5 | 39.8 | 126 | 95.1 | 50.4 | 131 | 74.5 | 49.4 |
平均值 | 126 | 89 | 41.1 | 121 | 90.7 | 48 | 129 | 75.9 | 46.8 |
SD | 2.7 | 1.9 | 0.92 | 3.7 | 3.4 | 2.2 | 2.2 | 2.1 | 3.3 |
CV(%) | 2.1 | 2.2 | 2.2 | 3.1 | 3.7 | 4.7 | 1.7 | 2.7 | 7.1 |
【结果】
人血清样品的CV（%）为2.1%-2.2%、小鼠血清样品的 CV（%）为3.1-3.7%，大鼠血清样品的 CV（%）为1.7-7.1%，所有结果均良好。
稀释线性试验
使用产品附带的标准品稀释液，按倍数稀释2种浓度的人血清/血浆（EDTA）、小鼠血清/血浆（EDTA）和大鼠血清/血浆（EDTA）后，进行检测并确认线性关系（平行检测两次）。
【结果】
检测范围内均显示出良好的线性关系。
加标回收测试
向人血清/血浆（EDTA）、小鼠血清/血浆（EDTA）和大鼠血清/血浆（EDTA）中添加3种浓度的标准品，并进行加标回收测试（平行检测两次）。
人
添加量(mg/dL) | 实测值(mg/dL) | 回收量(mg/dL) | 回收率(%) | |
血清 | - | 75.2 | - | - |
7.12 | 82.3 | 7.1 | 100 | |
28.5 | 103 | 27.8 | 97.5 | |
35.6 | 112 | 36.8 | 103 | |
血浆 （EDTA） | - | 84.5 | - | - |
10.6 | 93.8 | 9.3 | 87.7 | |
21.2 | 107 | 22.5 | 106 | |
26.5 | 112 | 27.5 | 104 |
小鼠
添加量(mg/dL) | 实测值(mg/dL) | 回收量(mg/dL) | 回收率(%) | |
血清 | - | 86.6 | - | - |
15.9 | 102 | 15.4 | 96.9 | |
23.8 | 112 | 25.4 | 107 | |
39.7 | 126 | 39.4 | 99.2 | |
血浆 (EDTA) | - | 97.7 | - | - |
14.4 | 112 | 14.3 | 99.3 | |
28.9 | 126 | 28.3 | 97.9 | |
36.1 | 133 | 35.3 | 97.8 |
大鼠
添加量(mg/dL) | 实测值(mg/dL) | 回收量(mg/dL) | 回收率(%) | |
血清 | - | 14.6 | - | - |
13.7 | 28.7 | 14.1 | 103 | |
41 | 53 | 38.4 | 93.7 | |
68.4 | 77.1 | 62.5 | 91.4 | |
血浆 （EDTA） | - | 16.2 | - | - |
16 | 31.9 | 15.7 | 98.1 | |
48.1 | 64.4 | 48.2 | 100 | |
80.2 | 90.6 | 74.4 | 92.8 |
【结果】
均得到良好的回收率。
实际样品的检测
使用本产品检测人血清/血浆、小鼠（ICR）血清/血浆样品和大鼠（SD）血清/血浆。
人
样品No. | 检测值 (mg/dL) | 平均值 (mg/dL) | SD | CV(%) | ||
血清 | 1 | 189 | 187 | 188 | 1.4 | 0.75 |
2 | 88.8 | 93.2 | 91 | 3.1 | 3.4 | |
3 | 85.7 | 85.7 | 85.7 | 0 | 0 | |
4 | 99 | 93.9 | 96.5 | 3.6 | 3.7 | |
5 | 95.8 | 94 | 94.9 | 1.3 | 1.3 | |
血浆 （EDTA） | 1 | 122 | 121 | 122 | 0.71 | 0.58 |
2 | 88.3 | 88 | 88.2 | 0.21 | 0.24 | |
3 | 85.9 | 84.4 | 85.2 | 1.1 | 1.2 | |
4 | 93.9 | 97.2 | 95.6 | 2.3 | 2.4 | |
5 | 95.1 | 95.4 | 95.3 | 0.21 | 0.22 | |
小鼠
样品No. | 检测值 (mg/dL) | 平均值 (mg/dL) | SD | CV(%) | ||
血清 | 1 | 32.6 | 33.4 | 33 | 0.57 | 1.7 |
2 | 33.6 | 31.3 | 32.5 | 1.6 | 5 | |
3 | 33.4 | 32.4 | 32.9 | 0.71 | 2.1 | |
4 | 34.5 | 33.4 | 34 | 0.78 | 2.3 | |
5 | 36.1 | 34.1 | 35.1 | 1.4 | 4 | |
血浆 | 1 | 21.2 | 20.8 | 21 | 0.28 | 1.3 |
2 | 16 | 17.7 | 16.9 | 1.2 | 7.1 | |
3 | 25.5 | 21.2 | 23.4 | 3 | 13 | |
4 | 19.1 | 20.3 | 19.7 | 0.85 | 4.3 | |
5 | 18.9 | 19.6 | 19.3 | 0.49 | 2.6 | |
大鼠
样品No. | 检测值 (mg/dL) | 平均值 (mg/dL) | SD | CV(%) | ||
血清 | 1 | 43.3 | 37.9 | 40.6 | 3.8 | 9.4 |
2 | 44.4 | 42.3 | 43.4 | 1.5 | 3.4 | |
3 | 42.7 | 44 | 43.4 | 0.92 | 2.1 | |
4 | 44.9 | 43.2 | 44.1 | 1.2 | 2.7 | |
5 | 50 | 51.1 | 50.6 | 0.78 | 1.5 | |
血浆 | 1 | 30.7 | 30.1 | 30.4 | 0.42 | 1.4 |
2 | 33.7 | 32.8 | 33.3 | 0.64 | 1.9 | |
3 | 39.2 | 36.5 | 37.9 | 1.9 | 5 | |
4 | 30.7 | 30.9 | 30.8 | 0.14 | 0.46 | |
5 | 33.9 | 36.7 | 35.3 | 2 | 5.6 | |
◆Q＆A
关于样品
Q1 使用哪种样品比较合适？
A1 请尽量使用新鲜的血清/血浆样品，避免使用反复冻融的样品，否则可能会导致脂蛋白变性。
Q2 使用哪种血浆抗凝剂比较合适？
A2 可使用肝素、柠檬酸盐或EDTA，它们在正常的使用量下几乎不会影响检测值。
Q3 如何检测超过检测范围上限的样品？
A3 对于超过检测范围上限的样品，请使用生理盐水稀释后再进行检测。将得到的值乘以稀释倍数即可得出检测值。
Q4 如何检测甘油三酯水平较高（1000mg/dL）的血清样品？
A4 对于甘油三酯水平超过1000mg/dL的血清样品，请使用生理盐水稀释后再进行检测。将得到的值乘以稀释倍数即可得出检测值。
关于试剂盒使用
Q1 使用本试剂盒检测时需要什么器具和装置？
A1 使用本产品时所需的器具和装置如下。
● 微孔板（透明，96 孔）
● 微量移液器
● 恒温水浴锅（37°C）
● 微孔板摇床（混匀仪）
● 酶标仪（600 nm/700 nm滤光片）
Q2 标准品中应添加多少纯净水？
A2 标准品中添加的纯净水量因批次不同而有所差异，具体请参考试剂盒附带的说明书中的指定量。
◆产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 291-96701 | LabAssay™ LDL-Cholesterol LabAssay™ LDL胆固醇 | 100 tests | 细胞生物学用 |
相关产品
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
| 635-50981 | LabAssay (TM) Cholesterol LabAssay™ 胆固醇 | 100 tests |
| 299-96501 | LabAssay™ LDL-Cholesterol LabAssay™ LDL胆固醇 | 100 tests |
