血液外泌体提取试剂盒

血液外泌体提取试剂盒 产品名称：血液外泌体提取试剂盒
预期用途：用于从血液中提取外泌体，供科研、临床上对外泌体的研究或分析诊断。
检验原理： 外泌体(Exosome)是活细胞分泌到胞外的囊泡样小体，含有多种蛋白和核酸分子（DNA、RNA、miRNA等)，参与体内细胞间通讯，细胞迁移和细胞生长等过程，对于体内细胞间物质和信号转导中有重要作用。由于外泌体里的蛋白和核酸分子被囊膜包裹而被保护，稳定性高，不易降解，成为潜在的可用于许多疾病特别是肿瘤的非常理想的新型生物标记物，对于癌症的早期诊断、用药监控、预后判断有重要意义

目前传统提取外泌体的方法主要是通过超速离心的原理实现外泌体的分离与纯化，设备成本巨大，操作程序繁琐复杂，耗时长达近20小时，对于操作者的技术要求很高，难以实现医学科研、临床检测上对外泌体领域应用开发的需求，因此需要快速有效的分离提取方法以适应科研、临床上对外泌体日益深入研究的需求。

产品特点：
1、本试剂盒是根据血液外泌体表面蛋白的生物学特性，快速地从血液中分离沉降出高纯度的外泌体。
2、本产品具有快速、简便、无需超速离心；样品用量少，提取效率高的特点。
3、通过知维生物提取试剂分离出来的外泌体，特异性好，稳定性强，有效地保持了其完整的生物结构和良好的生物活性，既可用于进一步的相关蛋白和核酸分析，也可进行外泌体载体的细胞生物学验证分析，具有广泛的应用前景。

细胞液外泌体提取试剂盒组成成分：

成分	体积
提取液1	0.5ml
提取液 2	0.5ml
提取液 3	8ml
重悬液	1ml

样本要求
1、准备新鲜或冻存的血液上清液置于冰上。如果样品是冻存的，放置于25-37 ℃水浴锅直至血液完全溶解后，置于冰上。
2、小心将血液上清液，过0.45um滤膜，收集过滤液。

操作步骤

1. 吸取0.5ml的血液到一干净的管子，56℃水浴15分钟
2. 4 ℃ 12000rpm离心5分钟，取上清至新的离心管
3. 向该离心管中分别加入0.05ml的提取液1和0.05ml的提取液2。
4. 上下颠倒管子或用移液枪吹打，直至血液上清液和提取液完全混匀。
5. 在冰上孵育2小时。
6. 4 ℃ 12000rpm离心10分钟。
7. 小心，快速吸去上清，加800ul的提取液 3，用移液枪反复吹打管底沉淀。
8. 4 ℃ 12000rpm离心10分钟。
9. 小心，快速吸去上清，用30ul 重悬液吹打，溶解管底外泌体沉淀。
10. 用于下游的蛋白、核酸、和其他分析。未及时使用时，分装后-80 ℃保存。

注意事项

1. 本试剂盒不适用于从其他体液或细胞上清中分离外泌体。其他相关体液的外泌体提取试剂盒是根据不同生物样品进行了相应的提取优化，请分别订购。
2. 通常情况下，0.25-0.5ml血液就能提供足够的外泌体样品用于常用的下游分析。
3. 对于从大体积的血液样品中（>5ml）分离外泌体，建议按照1ml/份进行相应的分装，提取以确保充分的外泌体提取效率。

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