蛋白酶K

巅峰生物生产的蛋白酶K，是一种来源于新发现的真菌蛋白酶K基因，经优化后异源重组表达得到的切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于该蛋白酶K在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白质的能力，因而被广泛应用于制备脉冲电泳的染色体DNA 蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。
严格的对比实验研究表明，巅峰蛋白酶K与现有市场上林伯氏白色念球菌来源的蛋白酶K产品相比，对大片段蛋白质的切割能力基本相同，而在小片段蛋白的降解能力方面较其他产品活力高出50%以上。
巅峰蛋白酶K的一般工作浓度是50-100μg/ml。在较广的pH范围内（pH4-12.5）均有活性。推荐反应缓冲液为50mM Tris-HCl (pH7.5)，10mM CaCl2。孵育温度为55至65℃，理想孵育温度为58℃；孵育时间为15分钟至48小时，理想孵育时间为2小时。在0.2-1%SDS或约10mM尿素存在的情况下，蛋白酶K显示更高的酶活性。常用浓度的EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、盐酸胍对蛋白酶K的活力影响不大。
巅峰蛋白酶K配制标准：20mg/ml。将200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，轻轻摇动，直至酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。巅峰蛋白酶K的保存：保存在-20℃冰箱里，避免反复冻融，有效期可达12月以上。