本试剂盒为一款基因组 DNA去除与逆转录反应在一步进行的且含高稳定性蓝色染料的新一代快速逆转录试剂盒,与 EZBioscience® Color Reverse Transcription Kit (with gDNA Remover) (Cat. No.: A0010CGQ)相比,不需要单独进行去除基因组 DNA的反应,操作更简便,并可有效降低复杂加样过程造成的样品污染与 RNA降解的风险。试剂盒中主要包括3管试剂:Enzyme Mix包含浓缩的 DNase、RNase Inhibitor和逆转录酶;5× Color All-in-one RT Buffer包含 buffer、dNTPs、Oligo dT18、Random Hexamer及蓝色染料;NC Buffer。 本试剂盒的 5× Color All-in-one RT Buffer中含有的高稳定性蓝色染料,在加样时提供了很好的视觉辅助,可以避免加样错误;它可与 EZBioscience® Color SYBR Green qPCR Mix(Cat. No.: A0012, A0012-R1, A0012-R2)一起使用,后者含有红色染料。qPCR加样时,本试剂盒逆转录生成的 cDNA(蓝色),与 EZBioscience® Color SYBR Green qPCR Mix(红色)混合后,会使溶液变成紫色。并且这两种染料不影响 qPCR反应的特异性和灵敏度。因此,建议将这两种试剂盒配套使用以获得最佳效果。 本试剂盒采用的新型 M-MLV突变体逆转录酶具有很强的抗干扰能力及扩增能力,同时又采用了优化的反应体系,进一步提高了逆转录效率。使用本试剂盒逆转录 15分钟得到的扩增产物量可以达到 AMV逆转录酶大约 1小时的产物量(Ct值相同)。后续逆转录产物建议用于 PCR、qPCR。
二、产品组分
Components | RT3C (100 Preps) | RT3C-L (500 Preps) |
Enzyme Mix | 200 μl | 200 μl × 5 tubes |
5×Color All-in-one RT Buffer | 400 μl | 400 μl × 5 tubes |
NC Buffer | 20 μl | 20 μl × 5 tubes |
Nuclease free ddH2O | 1 ml | 1 ml × 5 tubes |
三、保存条件
所有组分建议-20℃保存。
四、产品特点
1、简单高效:蓝色逆转录试剂,基因组去除与逆转录一步完成;
2、cDNA质量高。
五、注意事项
使用前将 5× Color All-in-one RT Buffer、Enzyme Mix及 NC Buffer从-20°C冰箱中取出,充分融化后均上下颠倒 10次左右使之充分混匀(很重要),短暂离心将管壁上附着的溶液甩下来,然后置于冰上待用。
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