【产品简介】
本试剂盒可从植物组织中快速提取总RNA，且可同时处理大量不同样品。提取的总RNA纯度高，无蛋白和其它杂质的污染，可用于RT-PCR、Real Time RT-PCR、芯片分析、Northern-Blot、Dot Blot、PolyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析和分子克隆等多种下游实验。
【产品特点】
安全低毒：无须使用酚氯仿等有机试剂，环境友好；
纯度高、完整性好：高纯度RNA可直接用于高纯度要求的下游实验；
操作简便：仅需30-40 min；
高效去除基因组：配有高效DNase I，高效去除基因组污染；
有效去除其他杂质：配有过滤柱。
【产品组成及保存】
| 产品组成 | TSP411（50 次） | 储存条件及稳定性 |
| 裂解液 RL(Buffer RL) | 30 mL | 15~25 ℃ , 加入 β- 疏基乙醇后2~8 ℃保存一个月 |
| 去蛋白液 RW1(Buffer RW1) | 40 mL | 15~25 ℃ |
| 漂洗液 RW(Buffer RW) | 12 mL | 15~25 ℃ |
| 无 RNA 酶双蒸水 (RNase-Free ddH2O) | 15 mL | 15~25 ℃ |
| RNase-Free 吸附柱 CR3( 含 2 mL 收集管 ) (RNase-Free CoIumns CR3 set) | 50 个 | 15~25 ℃ |
| RNase-Free 过滤柱 CS( 含 2 mL 收集管 ) (RNase-Free CoIumns CS set) | 50 ×2个 | 15~25 ℃ |
| RNase-Free DNase I (1500 U) | 1支 | 4 ℃ |
| RDD 缓冲液 (DNA 消化缓冲液 ) (Buffer RDD(DNA Digest Buffer)) | 4 mL | 4 ℃ |
| 无 RNA 酶双蒸水 (RNase-Free ddH2O) | 1 mL | 4 ℃ |
| RNase-Free 离心管 (1.5 mL) (RNase-Free Centrifuge Tubes (1.5 mL) | 50 个 | 15~25 ℃ |
1. 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌、汗液及RNase等，可能导致RNA降解。
2. 使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3. RNA在裂解液SL中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。
4. 配制溶液应使用RNase-Free ddH2O。(将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%(V/V)，混匀后放置过夜，高压灭菌。)
5. 操作前在SL中加入β-巯基乙醇（2-Hydroxy-1-ethanethiol）（自备）至终浓度5%，如475uL SL中加入25 uL巯基乙醇（2-Hydroxy-1-ethanethiol）。此裂解液最好现用现配。配好的SL 4℃可放置一个月，裂解液SL在储存时可能会形成沉淀，若有沉淀出现，请加热溶解后使用。
6. 第一次使用前应在漂洗液RW中加入无水乙醇，加入量参见瓶上标签。
【操作流程】
【问题讨论】
Q1：如果RNA提取过程中过滤柱CS发生堵塞怎么办？
A1：如果样品杂质较多在加入裂解液后可先离心然后取上清液再进行后续过滤处理。或者增大离心转数，增加离心次数和时间。
Q2： 提取RNA做了DNA去除的步骤，结果依然有DNA污染？
A2： 样品用量超过试剂盒规定的样本量会影响裂解效果，另外次生代谢物含量高的样本提取RNA时可能出现这种情况。可以延长DNase I消化时间或重复消化。
Q3： 为什么我提取的RNA产量低？
A3：
1）多糖多酚的样本，建议使用RNAprep Pure多糖多酚植物总RNA提取试剂盒（TSP412）。
2）样品裂解不充分，或者样品用量过少或过多，请严格按照说明书进行样品取样及研磨裂解处理。
3）洗脱不充分，RNase Free H2O需直接加到膜中央，静置2 min后再离心，必要进行二次洗脱来提高产量。
4）吸附柱中有乙醇残留，最后用RW漂洗后需再次离心，开盖晾干吸附柱中的乙醇。
【实例分享】
广泛适用于各种难提植物组织，提取的RNA含量高、完整性好、纯度高、无gDNA残留。
RNA得率
| 植物样品（100 mg） | 总 RNA 提取量 （µg） |
| 拟南芥 | ~35 |
| 玉米 | ~25 |
| 西红柿 | ~65 |
| 烟草 | ~60 |
本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。
