qRT-PCR专用逆转录预混液：PreScript III

更高效的qRT-PCR专用预混液

产品概述 本产品基于PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase，包含合成高质量cDNA所需的所有成分，适合于两步法RT-qPCR检测。通过定点突变得到的PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase是RNase H活性缺失的全新逆转录酶，酶的热稳定性和cDNA合成效率得到大幅提升。2× RT Reaction Mix包含优化的缓冲体系、Oligo (dT)₂₃VN、Random hexamers和dNTPs，PreScript Ⅲ Enzyme Mix包含PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase和RNase Inhibitor。此外，产品针对qPCR进行特别优化，可以在15 min内短时高效地合成qPCR所用的模板cDNA。  
产品内容

组分	R420A/ 50rxn	R420B/ 100rxn
2× RT Reaction Mix	500 μL	1 mL
PreScript Ⅲ Enzyme Mix	100 μL	200μL
RNase-free ddH2O	1 mL	1 mL

 

产品优势 高度的热稳定性：全新的逆转录酶PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase具有更好的热稳定性 对复杂模板具有良好的延伸性能：在50℃条件下反转录反应也可以使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸 模板兼容性高：兼容不同物种及完整度较差的Total RNA 短时高效的进行逆转录：优化比例的Random primers/Oligo (dT)₂₃VN primer mix，可以在15 min内短时高效地合成qPCR所用的模板cDNA
实验案例
1.  优异的cDNA合成效率
   
  在10 μL反应体系中分别添加HeLa细胞来源的Total RNA 0.5 μg~0.5 pg，分别进行逆转录反应。然后，在Realtime PCR反应液(使用本公司S018产品)中分别添加上述的逆转录反应液各1% (V/V)，用Realtime PCR对ACTB和B2M的cDNA量进行定量，然后进行cDNA合成量的比较。结果可见，在探讨的范围内，模板RNA的量和cDNA的得率密切相关，但无论模板RNA量的多寡，仍可维持很高的cDNA合成效率。可见在目的片段浓度有差异的样品之间，逆转录反应效率的变化并不大，因此可将定量结果的误差控制在最小范围内。
2.  与其他公司逆转录性能的比较
    以梯度稀释的HeLa细胞Total RNA为模板，在说明书提供的反应体系及反应条件下进行逆转录，然后用Realtime PCR 进行检测。结果表明，与A公司同类产品相比，PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase产品具有更高的逆转录性能。
3.  对不同模板的逆转录能力
    以HeLa细胞Total RNA为模板，挑选高、中、低三种表达量的基因，在说明书提供的反应体系及反应条件下进行逆转录，然后用Realtime PCR检测多对基因，结果表明，对不同表达量的基因，本产品都具有优异的逆转录能力。  
应用范围 合成用于qPCR的cDNA模板，高质量 cDNA合成；全长cDNA文库的构建等。