qRT-PCR专用逆转录预混液：PreScript Ⅱ RT

预混液形式的qRT-PCR优选试剂

产品概述 产品保留了完整的PreScript II Reverse Transcriptase蛋白结构, 具有与野生型相同的聚合酶活性, 可用于较长的cDNA合成以及全长cDNA文库的构建等。产品包含合成高质量cDNA所需的所有成分，适合于两步法RT-qPCR检测。2× RT Reaction Mix包含优化的缓冲体系、Oligo (dT)₂₃VN、Random hexamers和dNTPs。此外，产品针对qPCR进行特别优化，比例优化的Random primers/Oligo (dT)₂₃VN primer mix，可以在45 min内高效合成qPCR所用的模板cDNA。
产品内容

组分	R419A	R419B
2× RT Reaction Mix	500μL	1ml
Prescript Ⅱ Enzyme Mix	100 μL	200 μL
RNase-free ddH2O	1 mL	1 mL

 

产品优势
更高效的逆转录效率：PreScript II Reverse Transcriptase保留了完整的蛋白结构, 具有与野生型相同的聚合酶活性，提高了逆转录效率
操作简便的预混型试剂：只要添加模板RNA和水，就可以简便高效率地合成cDNA，且重复性良好
宽广的模板使用范围：反应体系中Total RNA的使用范围非常宽广，便于使用
广阔的可定量扩增区间：比例优化的Random primers/Oligo (dT)₂₃VN primer mix可均一、高效地在RNA全序列范围内进行逆转录，因此可得到更广的可定量扩增区域

实验案例
1.  优异的cDNA合成效率
    在10 μL反应体系中分别添加HeLa细胞来源的Total RNA 0.5 μg~0.5 pg，分别进行逆转录反应。然后，在Realtime PCR反应液(使用本公司S018产品)中分别添加上述的逆转录反应液各1% (V/V)，用Realtime PCR对ACTB和B2M的cDNA量进行定量，然后进行cDNA合成量的比较。结果可见，在探讨的范围内，模板RNA的量和cDNA的得率密切相关，但无论模板RNA量的多寡，仍可维持很高的cDNA合成效率。可见在目的片段浓度有差异的样品之间，逆转录反应效率的变化并不大，因此可将定量结果的误差控制在最小范围内。
2.  强大的逆转录能力
    以HeLa细胞Total RNA为模板，选择高、中、低三种表达量的基因，在说明书提供的反应体系及反应条件下进行逆转录，然后用Realtime PCR检测多对基因，结果表明，对不同表达量的基因，本产品都具有优异的逆转录能力。
应用范围
合成用于qPCR的cDNA模板，特别是较长的cDNA合成；全长cDNA文库的构建。