TGIRT-III Reverse Transcriptas

主要特征
1、比逆转录病毒逆转录酶更高的热稳定性，持续性和保真度，允许从高度结构化或严格修饰的RNA进行全长的端到端cDNA合成。
2、新的端对端模板转换活性，其能够在逆转录过程中连接RNA-seq或PCR接头，并且不再需要单独的RNA 3'-接头连接步骤
3、不需要RNA连接酶，对模板量要求低，使得RNA-seq文库构建步骤简化从而更高效。
产品描述：TGIRT-III RTnase 具有依赖于 DNA/RNA 杂交链的反转录酶活性，能快速合成 cDNA，该酶具有强的链转换活性（Switch）。因此该酶可用于 tRNA、ncRNA、miRNA 等核酸分子的同步逆转录和加接头（TGIRT template-switching reaction，用于 TGIRT-Seq）。TGIRT-III RTnase 具有极强的延伸性能，因此更易获得全长的 cDNA。除此外，该酶具有的强 switch 活性，使得可以利用 RNA 的 5’端帽结构进行SMART 建库（SAMRT-Seq）。该酶的反应温度为 37-60°C，最佳反应温度为 50°C。

产品组分

组分名称 1nmol TGIRT-III RTnase (10 pmol/μl) 100 μl 5×TGIRT Buffer 1 ml 100mM DTT 0.5 ml

产品 应用
链特异性转录组分析全细胞或无细胞转录组测序非编码 RNA 转录组测序RIP-seq, HITS-CLIP, irCLIP and CRAC通过高通量测序鉴定 RNA 碱基修饰RNA 结构映射长 cDNA 的合成全基因组或靶向 RNA 结构分析
失活：反应结束后，向反应体系中加入 1μl 的 5N NaOH，并置于 95°C 下加热 3min，失活该酶。失活后加入 5N HCl中和高碱性条件。