一、试剂盒组成
细胞周直腔裂解液A 5ml 1瓶
细胞周直腔裂解液B 5μL 1瓶
二、储存条件
该试剂置于室温(2-8℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于-20℃。
三、操作步骤
使用前,先明确所需裂解液的量,按照溶液A/溶液B=1000/1的比例混合,混合后立即使用。(例如:试验需裂解液5mL,分别吸取溶液A 5mL、溶液B 5μL,混合均匀后立即使用。)
基因工程菌经诱导培养后离心收集菌体,尽量将诱导培养基弃掉,菌体储存于-80℃,反复冻融2-3次后,加入诱导培养基体积1/20的预混好的本裂解液,充分重悬,冰上100rpm振荡1h,8000rpm 15-20min,收集上清即为目的蛋白,4℃保存。
四、注意事项
1、冰上振荡时尽量保证液体充分撞击管壁
2、离心时间根据菌体浓度而定。