蛋白组学前处理试剂盒

蛋白组学前处理试剂盒
产品概述

目前常规的蛋白质组样品前处理过程存在着诸多问题，如重现性差、方法稳定性不好、灵敏度不高且非常耗时及无法自动化等。针对上述问题，逸微健华推出新一代“All In One Tube”的创新产品，本产品主要是针对微量蛋白（5-100 μg）的处理，即便是没有组学背景的科研人员，也可以快速的制备前处理的样品，可用于后续的质谱分析。

产品组分及储存条件
 

名称	规格	储存条件
Lysis buffer	1.5 ml	-20 ℃
Balance buffer	5 ml	4 ℃
Digest buffer	0.5 ml	-20 ℃
Stop buffer	1 ml	RT
Wash buffer 1	15 ml	RT
Wash buffer 2	15 ml	RT
Elution buffer	25 ml	RT
Loading buffer	5 ml	RT
Tip柱	48 T	RT

操作流程
 

1. 裂解

• 取20 μL的Lysis buffer加入到含有样品的EP管中，震荡混匀；
• 将含有Lysis buffer的EP管水浴95℃、10 min，然后取出冷却至室温。

1. 酶解

• 向冷却至室温的EP管中加入90 μL的Balance buffer；
• 加入1 μL的Digest buffer后混匀，37 ℃，震荡酶解12-16 h。

1. 除盐（室温）

• 向样品中加入10 μL的Stop buffer，涡旋混匀；

② 将样品转入Tip柱中，500 rpm/min，离心3-5min，直到液体全部离心下来，如果液体流速较慢，可以加大转速；
③ 向脱盐柱中加入200 μL的Wash buffer 1（用之前震荡10-20 s）,500 rpm/min，离心3-5 min，直到液体全部离心下来;
④ 向脱盐柱中加入200 μL的Wash buffer 500 rpm/min，离心3-5 min，直到液体全部离心下来;
⑤ 将脱盐柱重新放入一个新的EP管中，向脱盐柱中加入200 μL的Elution buffer，500 rpm/min，离心3-5 min，直到液体全部离心下来；
⑥重复步骤⑤，收集两次的洗脱液，冷冻干燥；
⑦加入10 μL的Loading buffer, 剧烈涡匀3 min，离心20，000 g、10 min，取适量样品，即可质谱检测。以HF-X仪器为例，上样0.5-1μg即可。

注意事项和免责说明
本产品仅限于专业人员的科学研究使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。