细菌蛋白提取试剂盒
细菌蛋白提取试剂盒产品简介: 我公司细菌总蛋白提取试剂盒可以从各种菌体中提取总蛋白,包括革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌,可用于纯化蛋白的粗品制备及总蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的蛋白具有天然活性,可用于报告基因检测、SDS-PAGE 电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验。每毫升菌液大概可以提得5-10mg 蛋白。采用BCA 或Lowry 法进行蛋白定量。 细菌蛋白提取试剂盒产品特点: 1、使用方便:不需昂贵设备。 2、可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。 3、将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。 4、采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。 5、含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。 6、紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。 7、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。 8、本试剂盒中不有 EDTA,与金属螯和层析等兼容。 试剂盒以外自备试剂和仪器 ● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管 ● 涡旋振荡器 ● 冰箱,冰盒 细菌蛋白提取试剂盒使用方法: 细菌蛋白提取试剂盒使用注意事项: 1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。 2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。 3. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。 4. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。 5. 本试剂盒中提取液和蛋白酶抑制剂中均不含 EDTA,根据需要可自行加入。 细菌蛋白提取 1、裂解液的准备:根据所需要提取的样本量,每500ul裂解液中加入2ul蛋白酶抑制剂Mix和2ul磷酸酶抑制剂Mix和5ul蛋白稳定液,充分混匀后置冰上备用。 2、在4℃ 12000RPM条件下将菌液离心5min,弃上清,尽量吸干剩余液体,收集菌体,用PBS洗菌体2次。若为冷冻菌体直接进行下面操作步骤即可。 3、按每20mg湿重菌体样本加入500ul裂解液,吹打混匀,冰上放置20-30分钟。 4、300w,10s超声/10s间隔条件下冰浴超声至菌液变清。 5、在4℃ 12000RPM条件下将菌液离心5分钟,将上清移入冷的干净离心管。 6、即得到总蛋白样品。 7、将总蛋白样品定量后分装置于-80℃冰箱或直接用于下游实验。