植物总蛋白提取试剂盒

产品简介： 本试剂盒提供全套试剂，适用于从各种植物细胞、组织样本中提取总蛋白。提取过程简单方便。本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等蛋白研究。本试剂盒提取的蛋白不可用于2D 电泳。如下游实验需要用于2D 电泳、等电聚焦电泳，请使用其他货号的试剂盒。 试剂盒以外自备试剂和仪器 ● 移液器、吸头● 离心机及离心管 ● 涡旋振荡器● 冰箱，冰盒 使用方法： 使用注意事项： ? 1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。 ? 2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。 ? 3.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。 植物组织样本： 1、提取液准备：每500ul 冷的提取液中加入4ul 蛋白稳定剂和2ul 蛋白酶抑制剂，混匀后置冰上 备用。 2、取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的200mg 鲜嫩植物组织样本剪碎，采用以下一种方法处理： i. 加入500ul 提取液A 后用匀浆机/匀浆器匀浆。 ii. 置于研钵中用液氮研磨，研磨后加入500μl 冷的提取液A。 iii. 加入500ul 提取液A 直接置冰上研磨。 3、研磨后吸入一个预冷的干净离心管中在冰上或4℃冰箱静置1 小时。 4、在4℃，12000rpm 以上条件下离心10-15 分钟。 5、将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到总蛋白。 上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。 细胞样本： 1、提取液准备：每500ul 冷的提取液中加入4ul 蛋白稳定剂和2ul 蛋白酶抑制剂，混匀后置冰上备用。 2、细胞用PBS 洗涤2 次。 3、加入细胞体积5-10 倍体积的蛋白提取液，振荡1 小时。 4、在4℃，12000rpm 以上条件下离心10-15 分钟。 5、将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到总蛋白。 上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。 冻存样本： 1、冻存组织样本参照上述组织样本步骤操作。 2、冻存细胞样本中直接加入5-10 倍体积的蛋白提取液，振荡30 分钟。 3、在4℃，12000rpm 以上条件下离心15 分钟。 4、将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到总蛋白。 上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。