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Invitrogen 11904018 用于 RT-PCR 的 SuperScript 第一链合成系统 50 次反应
| 项目 | 详情 |
|---|---|
| 产品规格 | 试剂盒 |
| 高 GC PCR 扩增效果 | 高 |
| 反应速度 | 50 min。 |
| 技术 | 反转录 |
| 最佳反应温度 | 42°C |
| 引物 | 随机引物，Oligo dT 引物 |
| 数量 | 50 rxns |
| 逆转录酶 | SuperScript II |
| 运输条件 | 湿冰 |
| 适用于（应用） | RT-PCR |
| 最终产品类型 | 第一链 cDNA |
| 反应次数 | 50 次反应 |
| 反应形式 | 单独组分 |
| 试剂类型 | 反转录 |
| 尺寸（最终产品） | 长达 12 kb |
| 原始材料 | RNA |
| Unit Size | Each |
• Oligo(dT)12-18，50 μL (0.5 μg/μL)
• 随机六聚体，250 μL (50 ng/μL)
• 10X RT 缓冲液，1 mL
• 氯化镁,500 μL (25 mM)
• DTT，250 μL (0.1 M)
• dNTP 混合物，250 μL (10 mM)
• SuperScript™ II RT，50 μL (50 U/μL)
• RNaseOUT™，100 μL (40 U/μL)
• 大肠杆菌 RNase H，50 μL (2 U/μL)
• DEPC 处理水， 1.2 mL
• 对照 RNA，15 μL (50 ng/μL)
• 对照引物 A，20 μL (10 μM)
• 对照引物 B， 20 μL (10 μM)
储存在 –20°C 下。
Invitrogen 11904018 用于 RT-PCR 的 SuperScript 第一链合成系统 50 次反应
用于 RT-PCR 的 SuperScript™ 第一链合成系统经过优化，以从纯化 poly(A)+ 或总 RNA 合成第一链 cDNA。此系统可与低至 1 ng 或高达 5 µg 的总 RNA 一起使用。合成后，可通过 PCR 用特异性引物扩增 cDNA，而无需中间有机提取或乙醇沉淀。结合 PCR 时，该系统可用于检测稀有信息的存在，量化少量细胞的特异性 mRNA 的量或克隆特异性 cDNA，而无需构建整个 cDNA 文库。该系统具有灵活性，可使用任何 PCR 酶。结合 AccuPrime™Taq DNA 聚合酶或 Platinum™Taq DNA 聚合酶进行更高特异性 PCR，或结合 AccuPrime ™Pfx DNA 聚合酶进行高保真克隆应用。SuperScript II RT
第一链 cDNA 合成反应由 SuperScript™ II 反转录酶 (RT) 催化。这种酶经过基因改造，可降低在第一链反应期间降解 mRNA 的 RNase H 的活性，与使用 RNase H+ RT 时相比，可进行更多全长 cDNA 合成并提供更高的第一链 cDNA 得率。因为 SuperScript™ II RT 不会受到核糖体和转运 RNA 的显著抑制，所以可使用其从总 RNA 制备中高效合成第一链 cDNA。该酶表现出更高的热稳定性，可在高达 50°C 的温度下使用。
使用 SuperScript™ 第一链合成系统进行 RT-PCR
该系统已经过优化，以从不同量的起始材料合成第一链 cDNA。在此优化过程中，已降低 SuperScript™ II RT 浓度并向系统中添加了 RNaseOUT™ 重组 RNase 抑制剂。此外，已修改反应条件，以进一步提高系统的灵敏度。使用该试剂盒，您可以使用总 RNA 或 poly(A)+选定 RNA（由 oligo(dT)、随机引物或基因特异性引物引发）合成第一链 cDNA。然后，在另一根管中使用目标基因特异性引物进行 PCR。 Invitrogen 11904018 用于 RT-PCR 的 SuperScript 第一链合成系统 50 次反应仅供科研使用。不可用于诊断程序。
