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超级核酸酶
产品货号：FrdE00004
储存温度：2-8℃
来源：E.coli
1、产品简介
超级核酸酶(Benzonase Nuclease)是来源于Serratia Marcescens，经过基因工程
改造的核酸酶。它能够在非常广泛的条件下(6M urea，0.1 M Guanidine HC1 0.4%Triton
X-100，0.1%SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF)，降解所有形式的(双链，单链，线状，环状)DNA和RNA。它将核酸完全消化成3-8个碱基长度的5一单磷酸寡核苷酸。超级核酸酶适用于去除蛋白质产品中的污染，符合FDA关于核酸污染去除的规程。
本产品可以与多种细胞细菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白质产量。本公司超级核酸酶经特殊工艺表达纯化，无蛋白酶、内毒素污染，没有标签方便下游实验操作。
表1.超级核酸酶产品性能。
| 超级核酸 | 性能 | ||
| 浓度 | 1mg/ml | ||
| 酶活 | ＞25kU/mg | ||
| 最适合酶活pH | 8.0-9.0(可操作范围6.0-9.0） | ||
| 最适酶活温 | 37°C （温度范围0-37°C） | ||
| 蛋白酶活 | 无 | ||
| 辅助因子 | 5-10mM Mg 2+ | ||
| 储存缓冲液 | 20mM Tris, 20mM NaC|， 2mM,Mgcl2,10%Glycerol,pH8.0， | ||
| 储存温度 | ﹣20℃，避免反复冻融 | ||
1.2酶活定义
37°C，pH 8.0反应条件下，2.625ml的反应体积，在30分钟内使·A260值降低1.0(相
当于完全消化37 ug鲑鱼精DNA)的酶量定义为一个活性单位(U)。
1.3产品应用
1)去除核酸污染:在蛋白纯化时与细胞裂解液配合，可有效降低样品黏度，利于下游操作;
2)降解核酸，利于不可溶蛋白复性前高质量包涵体的制备;
3)有效去除带负电荷的核酸对蛋白样品分离和检测的影响;
4)疫苗和病毒样品制备过程中DNA污染的去除。
5)减少存放的外周血单细胞(PBMC)的结块现象。
6)用于对任何蛋白样品结合的核酸的预处理，提高蛋白在2D凝胶电泳中的分辨率。
2.操作步骤
2.1大肠杆菌或者其他细菌样本处理
细菌离心收集后，用10倍体积的TBS缓冲液重悬，菌体破碎后，每毫升菌体裂解液
加入1-2微升超级核酸酶(若添加终浓度为5-10mM的Mg2+，则效果更佳)，室温孵育
30分钟，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实验。
2.2细胞样本处理
1)贴壁细胞去除培养基，用PBS洗后，100微升RIPA裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解
液)加1-5微升超级核酸酶，室温孵育30分钟，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实
验。
2)悬浮细胞离心收集后，在离心管中加100微升RIPA裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解
液)加1-5微升超级核酸酶，室温孵育30分钟，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实
验。
2.3组织样本处理
将30-100毫克动物或者植物组织研磨充分后，加入100-200微升裂解液，同时加入
加1-5微升超级核酸酶，室温孵育30分钟，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实验。
3.注意事项
1)避免使用磷酸盐缓冲液。
2)含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品，对该酶活性有部分抑制作用，使用时需要增加
酶的用量。
3)超级核酸酶有超强的试剂兼容性如:6M urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4%Triton X-100，
0.1%SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF，100mM DTT，当超过该浓度时核酸酶活性会降低，可通过增加核酸酶量使活性得到补偿。
*本试剂仅供实验室研究使用
