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生物素连接酶(BirA)
产品货号：FrdE00020
来源：E.coli
1、产品简介
生物素连接酶(Biotin Ligase,BirA)是大肠杆菌BirA基因编码的双功能蛋白质,能识别蛋白质分子的特异性序列(BirA Substrate Peptide),使蛋白质生物素化。该酶带有6his标签，剪切反应完毕后可通过Ni-NTA去除。
表1.生物素连接酶产品性能。
| 超级核酸 | 性能 | ||
| 浓度 | 1mg/ml | ||
| 酶活 | ＞45kU/mg | ||
| 最适合酶活pH | 8.0-9.0(可操作范围6.0-9.0） | ||
| 最适酶活温 | 37°C （温度范围0-37°C） | ||
| 蛋白酶活 | 无 | ||
| 辅助因子 | 5-10mM Mg 2+ | ||
| 储存缓冲液 | 20mM Tris, 20mM NaC|， 2mM,Mgcl2,10%Glycerol,pH8.0， | ||
| 储存温度 | ﹣20℃，避免反复冻融 | ||
1.2酶活定义
37°C，pH 8.0反应条件下，将1pmol蛋白质或者多肽（融合BSP序列）生物素化所需要的
的酶量定义为一个活性单位(U)。
1.3产品应用
生物素标记融合BSP的蛋白质
2.反应体系
| 10×Binding buffer | 5ul | 1× |
| BirA | 1.5ul | 45U/ul |
| 蛋白或多肽 | 18.5ul | 40uM |
3.注意事项
1)含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品，对该酶活性有部分抑制作用，使用时需要增加
酶的用量。
2)生物素连接酶有超强的试剂兼容性如:6M urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4%Triton X-100，
0.1%SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF，100mM DTT，当超过该浓度时核酸酶活性会降低，可通过增加核酸酶量使活性得到补偿。
*本试剂仅供实验室研究使用
