兔/鼠通用型Streptavidin-HRP试剂盒（DAB）

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说明：产品表货号最后一段中横杠后的重量为产品的包装规格，例如A123456-500g,该货号对应的包装规格为500g。

中文名：兔/鼠通用型Streptavidin-HRP试剂盒（DAB） 
英文名：SP Rabbit & Mouse HRP Kit（DAB）
中文别名：-
英文别名：-
纯度：-
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产品介绍：产品内容：

产品简介 ：

本试剂盒根据生物素(Biotin)与链霉亲和素(Streptavidin)具有很强亲和力的原理设 计。在兔源或鼠源的一抗与相应的靶抗原结合后，本试剂盒中的生物素化抗••兔/鼠通 用型二抗与一抗特异结合；二抗上标记的生物素与标记了过氧化物酶（HRP）的链霉 亲和素结合，形成抗原～特异性一抗～生物素化的二抗～HRP标记的链霉亲和素复合 物。HRP可以催化底物显色，从而推断待检抗原的存在及分布。该试剂盒使用的生物 素化二抗、SA-HRP，均采用优化的标记和纯化技术，使得其染色有更高灵敏度和更低 的背景，适合于检测福尔马林固定石蜡包埋组织切片，以及冰冻切片、细胞爬片、新 鲜制备的血涂片等。兔/鼠通用型Streptavidin-HRP试剂盒适合与康为世纪即用型或浓 缩型抗体配套使用。

注意事项：

1．以每张切片加入1滴（约50 μl）计算，3ml可做60张切片， 18ml可做360张切片。 

2．对于内源性生物素含量比较丰富的组织，使用本试剂盒时最好用内源性生物素阻断 剂进行封闭。 

3．DAB工作液现配现用，配制好的工作液2-8°C避光1小时内有效。 

4．实验过程中避免组织片干燥，因此各步孵育时工作液用量必需充足，保证完全覆盖 组织样本，且尽量在湿盒中进行孵育。 

5．为获得最佳实验结果，请务必优化实验条件及试剂用量。 

6．DAB为可疑致癌物，使用时请采取必要的防护措施。 

7．本产品仅用于科研，不能用于人体反应或人体治疗

操作步骤 

1．常规处理欲检测的石蜡或冰冻组织切片或细胞爬片等样本。 

1）组织切片或细胞爬片染色前处理： a. 石蜡切片 脱蜡水化：60ºC烤片1小时，二甲苯脱蜡二次，每次5分钟；再依次浸入梯度乙醇 （无水乙醇－无水乙醇－95%－85%－75%乙醇）和蒸馏水中各5分钟水化。 b. 冰冻切片和细胞爬片 切片（或爬片）浸于0.01 M pH7.4 PBS洗涤3次×5分钟。然后用0.1%Triton X-100覆 盖组织（或细胞）浸润15分钟，0.01 M pH7.4 PBS洗涤2次×5分钟。 

2）石蜡切片的抗原修复：绝大大多数情况下，石蜡组织切片用柠檬酸缓冲液高压修 复都是适合的。 修复工作液配制：1 L去离子水中加入10 ml柠檬酸缓冲液（IHC抗原修复液, 100×) （Cat#：CW0128），混匀即可。 修复过程：修复液加入高压锅内，待修复切片浸于修复液中（必需没过组织），盖 上压力锅盖，加热至均匀喷汽，从喷汽开始计时，1~2分钟后压力锅离开热源，自 然冷却至室温，取出切片，蒸馏水淋洗后，再用PBS（0.01 M pH7.4）漂洗2次，每 次3分钟。 

2．滴加适量Solution A白色溶液，即内源性过氧化物酶封闭液室温孵育10分钟，PBS充 分淋洗。 

3．滴加适量Solution B白色溶液，即封闭用正常羊血清工作液，室温孵育10分钟，甩干。 

4．滴加适量一抗工作液（商品化即用型抗体或适当比例稀释的浓缩抗体），按实验要 求孵育，然后PBS充分淋洗。 

5．滴加适量Solution C黄色溶液，即生物素标记羊抗兔/鼠二抗工作液，室温孵育10分钟， PBS充分淋洗。 

6．滴加适量Solution D红色溶液，即HRP标记的链霉亲和素，室温孵育10分钟，PBS 充分淋洗。 

7．DAB显色工作液配制：根据需要量，将DAB-A和DAB-B以1：19的体积比混匀后即 为DAB显色工作液。也可选择每毫升试剂B中滴加1滴（约50 μl）试剂A，混匀即可。 

8．显色：加适量的DAB显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上即可显色，显 色时间一般为1-5分钟。显微镜下观察控制显色时间，当达到最佳显色效果后，自来 水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明，封片后可长期保存。