ColProof®植物 RNA 快速提取试剂盒 (多糖多酚类) Col-R0202
试剂盒应用 本试剂盒采用专门针对多糖多酚类植物开发的裂解液 PP,在 10 分钟内完成植物叶片、根、茎、花 蕊、种子等的裂解、提取和纯化。提取对象包括棉花、马铃薯、铁皮石斛等。整个提取无需使用蛋 白酶 K 等酶类制剂。该配方中含有 RNA 保护剂,能够抑制 RNA 降解、保护 RNA 完整,从而提高 产量。提取 RNA 可用于 RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、分子克隆、文库构建等。 本试剂盒仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等领域。
使用方法 1. 20-100mg 新鲜样本经过液氮研磨后,加入 700μL 裂解液 PP 和 35μLβ-巯基乙醇,涡旋 30 秒。 2. 55℃孵育 1 分钟。 备注:淀粉含量高的样本无须加热可直接进行步骤 3。 3. 12,000rpm 离心 1 分钟,取 500μL 上清液。 4. 加入 250μL 无水乙醇,上下颠倒混匀。 5. 全部加入 RNA 吸附柱中,12,000rpm 离心 1 分钟,倒掉收集管中废液。 6. 向 RNA 吸附柱中加入 500μL 洗涤液 PWA,12,000rpm 离心 30 秒,倒掉收集管中废液。 7. 向 RNA 吸附柱中加入 500μL 洗涤液 PWB,12,000rpm 离心 30 秒,倒掉收集管中废液。 8. 重复步骤 7 一次。 9. 12,000rpm 离心 2 分钟,倒掉收集管中废液。 10. 将 RNA 吸附柱放入无 DNase 无 RNase 离心管,加入 30-50μL 洗脱液 P,室温放置 1 分钟。 11. 12,000rpm 离心 2 分钟,得到 RNA 溶液,-80℃保存。
注意事项 1. 务必在超净台中进行操作,常换手套,防止 RNA 降解。 2. 尽可能使用新鲜样本进行 RNA 提取。 3. 使用无 DNase 无 RNase 的吸头和离心管,防止 RNA 降解,常更换吸头,防止交叉污染。 4. 为了提高洗脱效率,可提前将洗脱液 P 置于 65℃水浴后再使用。 5. 根据后续试验需求,请使用 DNase I(货号 QR0102)进行基因组清除。