转染试剂系列

  细胞转染实验即将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术，是分子生物和细胞生物学最常见的实验技术。将外源DNA 导入哺乳动物细胞的方法大致可分为两大类，即生物方法和物理化学方法。物理化学方法中常用的有磷酸钙法、显微注射、电穿孔、脂质体介导的转染，以及最近出现的以高分子聚合物为载体的基因传递技术。生物方法则主要是以病毒作为载体,通过病毒感染的方式将外源DNA 导入到细胞中, 其中以慢病毒及腺病毒转染系统最为常用。 科维创提供用于 DNA、siRNA、RNA 递送的多种转染试剂。   科维创转染试剂特点： 高效性：转染效率高，适用于大多细胞系 低毒性：转染的细胞仍保持很好的活性 广普性：普通细胞、难转染的原代细胞全面覆盖   细胞转染试剂产品列表：

产品货号	产品名称	产品规格	适用范围
HB-LF-1000	LipoFiter转染试剂	1mL	适用于普通细胞系转染，低细胞毒性
HB-LF3-1000	LipoFiter 3.0高效转染试剂	1mL	适用于普通细胞系和难转染细胞系，转染效率高
HB-RF-1000	RNA转染试剂RNAFit	1mL	适用于小RNA转染
HB-LLF-1000	LentiFit慢病毒包装专用转染试剂	1mL	适用于慢病毒包装共转染慢病毒质粒系统

 

细胞转染方法比较：

转染方法	原理	应用	特点
脂质体转染	阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA脂复合物，也能被表面带负电的细胞膜吸附，再通过融合或细胞内吞进入细胞	瞬转/稳转	实验操作简单，重复性高，细胞毒性低，适用性广
磷酸钙法	磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜被细胞内吞	瞬转/稳转	实验条件控制严格，难度较大，且不适用于原代细胞
病毒转染	利用病毒携带目的基因片段，感染目的细胞，主要有慢病毒、腺病毒和腺相关病毒	瞬转/稳转	转染效率高，可用于难转染的细胞及原代、悬浮细胞，病毒包装难度较大
电穿孔法	电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内	瞬转	适用性广，但细胞致死率高，DNA和细胞用量大
显微注射	使用一根超细的针头讲DNA,RNA或蛋白直接注入细胞质或细胞核	瞬转/稳转	适用这种方法的细胞不多，技术复杂设备昂贵

  应用案例：

客户案例1：

中国农业大学客户发表于Molecular Cancer，IF=41.444

文章标题：A novel polypeptide encoded by the circular RNA ZKSCAN1 suppresses HCC via degradation of mTOR

使用方法：LipoFiter 3.0转染质粒

文章figure2 circZKSCAN1编码一个206aa的多肽

 

客户案例2：

江苏大学医学院客户发表于Molecular Cancer，IF=41.444

文章标题：Tumor-derived exosomes induce N2 polarization of neutrophils to promote gastric cancer cell migration

使用方法：LipoFiter转染siRNA到BGC-823细胞

文章figure7 HMGB1在胃癌细胞中被沉默 siRNA