牛支原体PCR检测试剂盒
PCR Detection Kit for Mycoplasma Bovis
保存条件:保存于-20℃,避免反复冻融。没有反复冻融的情况下,保质期一年。
货号:M-bovi-20 包装:20次反应
货号:M-bovi-50 包装:50次反应
货号:M-bovi-100 包装:100次反应
牛支原体(Mycoplasma Bovis)是一种缺乏细胞壁的原核生物,形态易变,呈多形性(球状、杆状、丝状等),直径0.3–0.8 μm,细胞膜富含固醇(如胆固醇),基因组为小型环状DNA(约0.8–1.0 Mb),GC含量低(约29–33%),编码约600–700个基因,代谢途径简化,依赖宿主营养,生长条件为微需氧或兼性厌氧,生长缓慢(数日至数周),菌落呈典型“煎蛋样”(中心隆起,边缘透明),代谢主要靠发酵葡萄糖,部分菌株能分解精氨酸或尿素提供能量。牛支原体通过表面脂蛋白(如可变表面脂蛋白家族Vsp)介导黏附宿主上皮细胞,分泌过氧化氢、超氧化物等活性氧物质,破坏宿主细胞膜,利用抗原变异(如Vsp相变)抑制巨噬细胞和淋巴细胞功能,逃避宿主免疫应答,是牛烂肺病(又称牛传染性支原体肺炎)的病原体,可引起呼吸道疾病、乳腺炎、关节炎、中耳炎、生殖道感染及全身性败血症等多种疾病。
牛支原体可通过体外培养法进行检测,特异性高,可确认活菌存在,适合后续药敏试验和菌株分型,但耗时长,需数天至数周时间,灵敏度低,易受样本质量、抗生素使用或其他细菌污染的影响。血清学方法,如ELISA、间接血凝试验(IHA)、补体结合试验(CFT),也可用来检测牛支原体,其优点在于操作简便,适合大规模筛查和流行病学调查,且成本较低,无需复杂设备,缺点在于可能出现交叉反应(与其他支原体存在抗原相似性),无法区分自然感染与疫苗免疫抗体,感染后2-3周才能检出抗体。PCR法通过扩增牛支原体特异性基因片段,检测速度快,只需几个小时,具有高灵敏度(可检出极低拷贝数的DNA)和高特异性的特点。
研究发现,牛支原体的实验室菌株和野外分离获得的菌株存在抗原和遗传学上的变异,而基于稳定的管家基因的PCR可以排除上述变异的干扰。因此,牛支原体PCR检测试剂盒选取了一个种内变异很小的与DNA修复有关的基因进行PCR鉴定,经BLAST验证为特异性靶向牛支原体,与其他生物的基因组不产生交叉反应。检测22种不同的牛或羊寄生性支原体,仅有牛支原体产生特异性扩增条带。对13个实验室或野外分离的牛支原体菌株进行检测,均可产生特异性扩增条带。可见本试剂盒具有物种特异性,适用于牛支原体的鉴定和检测。
本试剂盒仅供科研使用。
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