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制品说明: 核酸内切酶VII是噬菌体T4的基因49的产品,分子量为18 kDa。T4核酸内切酶VII参与DNA包装、体内基因组重组和错配修复。已有体外实验证明,T4核酸内切酶VII亦可降解错配的单碱基、异源双链loop环和分支DNA,如四链的Holliday 结构和三链的Y型结构。 来源: 含T4 核酸内切酶VII基因过表达克隆的重组E.coli菌株。 单位定义: 1 单位(0.5ng) 指37℃ 、30 分钟内,在含有50mM Tris-HCl( pH 8.0), 10mM MgCl2, 10mM β-ME和 0.1 μg/μl BSA的缓冲液条件下,使1 pmol FAM标记的28 mer 寡核苷酸的四链Holliday结构的底物降解50%。 酶活:2000 U/μg |
表:T4 核酸内切酶 VII和T7 核酸内切酶 I进行比较 | T4 核酸内切酶 VII | T7 核酸内切酶 I | 酶蛋白分子量 | 18 KDa | 60 kDa | 功能 | 溶解酶 | 溶解酶 | 应用 | 酶突变检测技术(EMD) 降解分支DNA 检测或切割异源双链 | 酶突变检测技术(EMD) 降解分支DNA 检测或切割异源双链 | 来源 | 噬菌体T4 | 噬菌体 T7 | 蛋白设计 | T4核酸内切酶 VII | 麦芽糖结合蛋白(MBP)和T7核酸内切酶I 的融合蛋白 | 酶活 (四链Holliday 结构作用30分钟) | 高* 10单位的酶(275 fmol蛋白,酶与底物摩尔比1:70)降解四链Holliday 结构64%。 | 低* 40单位的酶(368 fmol蛋白,酶与底物摩尔比1:50)降解四链Holliday 结构43%。 | 特异性 | 高*(单分辨峰) (single resolved peak shown on CE) | 低*(有非特异性峰) (multiple resolved peaks shown on CE) | * 见图2比较结果。 |
酶储存液: 10 mM Tris-HCl、50 mM KCl 、1 mM DTT、0.1 mM EDTA 、50% 甘油 , 25°C条件下,pH 7.4 。 随酶提供: 10x T4 Endonuclease VII Reaction Buffer 10x T4 Endonuclease VII Reaction Buffer: 500 mM Tris-HCl 、100 mM MgCl2、100 mM β-ME、1 mg/ml BSA,25°C条件下,pH 8.0。 储存条件:-20℃保存 参考文献: 1. Golz, S., Birkenbihl, R. P., and Kemper, B. (1995), DNA Research 2, 277-284. |