♦ 电镜分析 DNA 结构(1) ♦ D 环突变(2,3) ♦ 用 RecA 蛋白包被的探针来进行文库筛选(4,5) ♦ DNA 靶位点的裂解(6) | 概述 Tth RecA 蛋白分离自嗜热栖热菌(Thermus thermophilus ),是 RecA 蛋白的同源蛋白。在最适温度65–75°C范围内,Tth RecA 蛋白具有依赖于ssDNA 的 ATPase 活性。由于具有极高的热稳定性,对于需要高温反应条件的分子生物学技术,如核酸扩增和测序来说 ,Tth RecA蛋白是一个理想的选择。 | 来源 重组 E. coli 菌株。携带有从嗜热栖热菌(Thermus thermophilus )克隆的 recA 基因。由 Biohelix 公司 (NEB合作公司) 研发。 | 质保声明 无核酸内、外切酶活性污染。每批次都检测了单链DNA依赖性ATPase活性,且经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示该酶纯度>95%。 | 单位定义 本品按纯蛋白含量销售。纯蛋白量在OD280 下测得(蛋白浓度为1 mg/ml时A280 值为:0.516;光程为1cm) 。 | 浓度 1 mg/ml。 | 分子量 36 kDa。 | 贮存条件 10 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25°C) ,100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1% TritonX-100 和50%甘油。-20°C贮存。 | 使用注意 Tth RecA 在任一聚合酶缓冲液中均有活性。每 50 μl 反应体系添加 400 ng 的 Tth RecA。 | 参考文献 (1) Wasserman, S.A. and Cozzarelli, N.R. (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 82, 1079–1083. (2) Biet, E. et al. (2001) Biochemistry , 40, 1779–1786. (3) Shortle, D. et al. (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77, 5375–5379. (4) Rigas, B. et al. (1986) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 83, 9591–9595. (5) Honigberg, S.M. et al. (1986) Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 83, 9586–9590. (6) Koob, M. et al. (1992) Nucleic Acids Res ., 20, 5831–5836. | |