产品介绍：
阿拉丁生产的Quick Hybridization Solution，也称Quick Hybridization Buffer，即UltraBio™快速杂交液，是一种用于Northern、Southern实验中RNA或DNA与RNA、DNA或Oligonucleotide探针快速高效杂交的溶液。本产品为DNase/RNase/Protease-free的无菌产品，可以和Biotin Northern Blot Kit 以及Biotin Northern Blot Kit (for Small RNA) 配合使用。本产品为高灵敏度快速杂交液，含有独特的杂交加速试剂(hybridization accelerator)，可以大大提高杂交速度和检测灵敏度，通常杂交2h即可达到杂交过夜的效果。本产品用于Northern检测小鼠肝脏总RNA中tRNA-Ala的效果参考图1，仅1ng的总RNA样品通过2h的杂交就可以获得和杂交过夜基本一致的良好检测信号。图1.使用阿拉丁生产的Quick Hybridization Solution 进行Northern检测时，分别杂交2h和杂交过夜的检测效果图。实验样品为小鼠肝脏组织中提取的总RNA，使用3’端生物素标记的Oligo探针检测。检测mouse-tRNA-Ala-TGC-3-1的探针为5’-TGGAGATGCCGGGGATCGAACC-Biotin-3’。实际检测效果会因为实验条件的不同而有所不同，图中效果仅供参考。Northern检测方法在1977年由斯坦福大学James Alwine、David Kemp和George Stark发明，可用于检测RNA的大小、丰度和电泳时的迁移位置等1, 2]。由于DNA Blot以其发明人Edwin Southern的名字命名为“Southern Blot”，与其类似的RNA Blot因此被命名为“Northern Blot” 1, 2]。Northern Blot包括以下主要步骤：RNA样品的分离与纯化，RNA样品的变性或非变性凝胶电泳，将凝胶中的RNA样品转印至尼龙膜或硝酸纤维素膜上，预杂交，与带有标记的特异核酸探针(DNA或RNA探针)杂交，最后经放射自显影、化学发光或显色的方法进行探针的检测1, 2]。其中基于化学发光的Northern检测，灵敏度非常高，又无需接触对于人体有伤害的放射性同位素，目前被广泛使用。Northern检测用于定性和定量检测目的RNA时，比qPCR或高通量测序要繁琐很多。Northern相对于qPCR和高通量测序，最大的优势是可以通过印迹检测确定目的RNA的长度或者说是电泳时的迁移位置，并且不受小RNA末端修饰的影响2, 3]。qPCR很难确定目的RNA的长度，高通量测序会受读长影响，以及RNA末端修饰的影响2, 3]。本产品为Northern检测提供了非常关键的快速高灵敏度的杂交液，给Northern杂交检测提供了极大的便利。本产品经DEPC (Diethyl pyrocarbonate，焦碳酸二乙酯)处理并高温高压灭菌处理，确保无DNase、RNase和Protease，即无DNA酶、RNA酶和蛋白酶。室温或4℃保存，至少一年有效。Quick Hybridization Solution在较低温度下容易有沉淀析出。如有沉淀出现，可在40-50℃水浴孵育，并在充分溶解后使用。本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明：
1.阿拉丁生产的 Quick Hybridization Solution，可用于尼龙膜上RNA或DNA样品与DNA、RNA或Oligonucleotide探针的杂交，也可以用于杂交前的预杂交。通常每100cm2尼龙膜进行预杂交和杂交时，需要使用10ml Quick Hybridization Solution。2.关于Northern检测的详细实验步骤，请参考阿拉丁生产的R0219 Biotin Northern Blot Kit或R0220 Biotin Northern Blot Kit (for Small RNA)。参考文献：1.Sabelli PA, Shewry PR. Methods Mol Biol. 1995;49:213-28.2.Segundo-Val IS, Sanz-Lozano CS. Methods Mol Biol. 2016;1434:29-43.3.Dave VP, Ngo TA, Pernestig AK, Tilevik D, Kant K, Nguyen T, Wolff A, Bang DD. Lab Invest. 2019 Apr;99(4):452-469.
