Language
产品介绍：
HLA-A、B、C基因是经典的HLA I类基因，负责将病毒或肿瘤等内源性抗原肽提呈给CD8+ T细胞，诱导人体产生CTL免疫杀伤效应。在中国人群中，基因频率大于1%的优势HLA-A、B、C等位基因分别有13种、25种和14种，在人群中的总频率分别达到95%、94%和93%左右。乙肝病毒的主要蛋白有4种：HBsAg、HBeAg（其中包含HBcAg全序列）、HBpol和HBx等蛋白。
本公司根据HBV上述4种蛋白抗原的全长氨基酸序列（包括我国流行的B和C基因型），通过6种T细胞表位肽预测数据库，虚拟预测了千余种被13种优势HLA-A、15种优势HLA-B和14种优势HLA-C分子提呈的HBV抗原肽，作为候选表位肽；然后收集1050位乙肝患者的新鲜外周血，将PBMC细胞与候选表位肽共培养6-20小时，通过胞内细胞因子染色和流式分析检测PBMC中被多肽激活而分泌IFN-γ的T细胞数量，筛选在患者体内具有真实免疫原性的HBV抗原T细胞表位肽。然后利用42种表达优势HLA-ABC分子的细胞株阵列进行HLA分子的多肽竞争结合实验，进一步分析每种表位肽的HLA交叉限制性，明确每种表位肽适合的人群广度。
通过大量的T细胞功能性实验，我们验证获得201种在体内具有真实免疫原性的HBV表位肽，组成广谱CD8+T细胞表位肽库，其中83种抗原肽被13种优势HLA-A分子提呈，77种被15种优势HLA-B分子提呈、41种被14种优势HLA-C分子提呈，且每种抗原肽能被 3-5 种 HLA 分子交叉提呈。这些优势HLA-A、B和C分子的基因总频率分别覆盖95%，71%和93%左右的中国人群。因此，本抗原肽库符合中国最广泛人群的HLA-ACBC基因多态性，具有中国人群普适性，并且具有丰富的HBV表位代表性，能检测至少201种CD8+ T细胞克隆。将这些抗原肽按照HBV抗原种类不同分成11个肽库，组装成HBV特异性T细胞定量检测试剂盒（第二代，ELISPOT法）, 定量检测乙型肝炎患者、乙肝相关的肝硬化和肝癌患者PBMC中具有免疫反应活性的HBV特异性的CD8+T细胞数量,为监测疾病进展、判断预后、评价疗效、指导临床治疗方案、预测停药后复发风险以及预测HBV相关肝癌的预后盒转归等提供全新的细胞免疫学指标。
试剂盒的优点：
1、定量检测具有反应活性的HBV特异性T细胞数量，目前市场上没有同类试剂盒。
目前国内外市场没有检测HBV特异性T细胞数量和功能的商业试剂盒。
2、适用于绝大多数患者，不需HLA等位基因分型
所用的201种抗原肽几乎遍布4种HBV蛋白的全长序列，能被上述 13 种优势 HLA-A 分子，15种优势HLA-B分子和14种HLA-C分子所提呈，其基因总频率分别覆盖 95%，71%和94%左右的中国人群。因此本试剂盒具有中国人群普适性。
3、采用真实的抗原肽库，检测的T细胞克隆种数众多
绝大多数研究用来检测HBV特异性T细胞的抗原肽都是一或两种HBV抗原的重叠肽，没有经过免疫原性验证，也不清楚其HLA限制性。本试剂盒所用的201种HBV抗原肽是利用1000余位乙肝患者的血标本经T细胞功能实验验证获得的真实抗原肽，遍布4种主要抗原，能检测至少201种CD8+ T细胞的反应活性，能真实反应乙肝患者的特异性细胞免疫功能状态。
4、同时观察患者针对HBV不同种类抗原的特异性T细胞反应活性
本试剂盒将201种抗原肽根据HBV抗原种类的不同分成11个肽库，因此在结果分析中可以观察HBV不同抗原在患者体内诱导的特异性T细胞反应。
5、同时观察患者整体T细胞库的反应活性
每份标本设置一个阳性检测孔，有丝分裂素PHA为刺激剂，既做阳性对照，又同时监测乙肝患者整体T细胞库的反应活性，属于临床已开展的淋巴细胞转化功能检测项目。
6、特异性好，灵敏度高，操作相对较简单，不需特殊仪器
在已知的抗原特异性T细胞检测方法中，ELISPOT是最经典的方法之一，被国内外广大科研工作者所使用和认同。它不但特异性好，而且灵敏度高，可以在一百万个细胞中检测出一个分泌特定细胞因子的阳性细胞，比流式细胞分析技术更加灵敏。
7、质量可靠，稳定性好，所使用的一抗、二抗和PVDF膜板都是从国外大公司进口
本试剂盒检测活细胞功能，重复性和稳定性都超过国家标准；在规定贮存条件下保质期达5个月。
