说明:TNT® Quick Coupled Transcription/Translation System(TNT® 快速转录/ 翻译偶联系统) 可方便地在一个试管内进行偶联的转录/ 翻译反应,适合真核生物无细胞蛋白质表达。TNT® 快速转录/ 翻译偶联系统将RNA 聚合酶、核苷酸、盐类、氨基酸、重组的RNasin® 核酸酶抑制剂与网织红细胞裂解物混合在一起,形成了TNT® 快速混合母液(Master Mix)。
TNT® 快速转录/ 翻译偶联系统有两种配置,分别对克隆在T7 或 SP6 RNA 聚合酶启动子下游的基因进行转录和翻译。使用这两种系统时,模板DNA 的量为0.2-2.0mg,模板可以是带有T7 或SP6 启动子的环状质粒DNA,也可以是含有T7 启动子的PCR 片段,将模板加入到TNT® 快速混合母液,反应体系为50ml,30℃下孵育60-90 分钟。表达反应可产生足够量的蛋白,用于包括GST pull-down 和凝胶阻滞电泳在内的多种实验。
无细胞体系表达出的蛋白的应用范围:
• GST pull-downs.
• 凝胶阻滞电泳
• 免疫共沉淀
• 蛋白质修饰的特征研究
• 蛋白:RNA 相互作用
• 蛋白活性研究
• 基因产物的确认
• 蛋白截短实验(PTT)
特点
• 应用广泛:TNT® 系统被广泛地应用于蛋白:蛋白、蛋白:核酸相互作用以及其他研究领域中。
• 省时:使用单管反应,即可在短至一个小时内获得蛋白产物,优于需几天才能产出蛋白的体内翻译方法。
• 体系完整:体系提供了您实验所需的全部试剂( 同位素除外)。
• 可信:无需考虑使用哺乳动物体外翻译系统常见的蛋白产物可溶性问题。
• 可靠:TNT® 快速系统经过严格的质量控制,确保最高水平的蛋白表达。