Lentibuilder™慢病毒包装试剂盒

作为慢病毒基因递送领域的杰出专家，云舟生物推出的LentiBuilder™慢病毒包装试剂盒可让您直接在自己的实验室轻松制备高质量的第三代慢病毒。该试剂盒采用我们专有的miniVec®技术开发，对包装系统进行了全面优化，确保包装出的慢病毒具有卓越的病毒滴度和转导效果。

亮点

超高滴度

可包装获得超高滴度（10⁷–10⁸ TU/ml）的常规慢病毒，同时也能可靠产出超大基因组的慢病毒。

使用简易

将高效的包装系统简化为两管试剂：一管是将包装质粒以最佳比例混合的预混液，另一管是高效的细胞转染试剂。

高兼容性

将试剂盒与通过云舟生物设计的转移质粒载体结合使用时，可为您带来最佳的病毒包装体验。

产品组分

运输和存储

LentiBuilder™慢病毒包装试剂盒以常温方式运输。收到该产品时，慢病毒包装预混液应存储于-20℃；细胞转染试剂应存储于4℃并避免反复冻融。该试剂盒以恰当条件储存时，其保质期约为一年。

注意：LentiBuilder™慢病毒包装试剂盒仅限于科研用途。该试剂盒通过云舟生物的专有技术开发，未经云舟生物事先同意，使用者不得转售或复制该试剂盒内的任何内容。

技术详情

慢病毒是最常用的可实现高效基因递送的病毒载体。慢病毒可将目的基因（GOI）永久整合至宿主细胞基因组，支持各种类型的体外、体内及离体应用，包括文库筛选、细胞稳转株构建、基于CRISPR技术的基因组编辑以及表达CAR分子等。一次成功制备第三代慢病毒的包装实验需要将转移质粒（携带GOI）和包装质粒（编码Gag/Pol、Rev以及VSV-G等包膜蛋白）共转染至包装细胞（比如293T细胞）。

图1 使用LentiBuilder™慢病毒包装试剂盒生产慢病毒的流程

我们通过深度优化慢病毒包装系统，开发出LentiBuilder™慢病毒包装试剂盒，可让您在自己的实验室包装获得的慢病毒达到与云舟生物生产的慢病毒相当的质量。该试剂盒包含两个组分：配比与浓度经过优化的包装质粒预混液，以及用于高效转染包装细胞的转染试剂。所有包装质粒均采用云舟生物miniVec®技术构建，可进一步提升所生产慢病毒的滴度、安全性、活性及批次一致性。

 

图3 使用LentiBuilder™包装系统生产的慢病毒转导难转导细胞类型。该数据来源于云舟生物客户并已取得可公开许可。

（A）使用携带EGFP报告基因的shRNA表达慢病毒转导小鼠原代海马神经元细胞。转导后第5天拍摄细胞图像（MOI=7）。

（B）使用携带EGFP报告基因的基因过表达慢病毒转导原代人造血干细胞。转导后第8天拍摄细胞图像（MOI=50）。

两组实验中：曝光时间=100 ms；放大倍数=100×。

 

图2 使用LentiBuilder™慢病毒包装试剂盒获得的慢病毒有着领先市场的功能滴度。我们对不同的慢病毒包装系统进行了测试对比，实验使用了携带不同类型的转基因以及病毒基因组大小各异的转移载体。所有系统均使用等量转移质粒，并按照各系统推荐的包装质粒用量和比例进行配置。实验最终采用qPCR测定293T细胞中的病毒功能滴度。实验结果表明，LentiBuilder™在所有载体类型中的表现均超越了其主要的竞争对手，即使对于基因组超大（>9.2 kb）的慢病毒也能高效进行包装并获得很高的滴度。