和元产品简介
本试剂盒是一种新的、快速、简洁的克隆方法。利用重组原理,无需内切酶和连接酶,不受载体和目的片段的酶切位点限制,载体构建仅需30分钟!适合任何载体,可以在载体的任意位置进行基因克隆,操作简便、快捷。
和元产品特点
• 灵活的位点选择:可以在载体的任意位置进行基因克隆
• 简便、快捷:PCR产物不需末端补平。载体只需线性化,不需去磷酸化载体
• 精确:表达产物不增加任何额外的氨基酸
• 多用途:适用于各种自备载体、插入片段、或者酶切位点
• 效率高:高达90%阳性克隆
• 高批量、批量克隆:可以用8连管,24、48、96孔板做高通量克隆
和元产品适用范围
- 载体DNA片段克隆
- 载体DNA转移
- 蛋白质表达
- 应用合成生物学
- 代谢工程
- 高通量克隆
和元保存条件
-20℃保存,1-2年
和元试剂盒组分
和元操作流程:
和元无缝克隆试剂盒操作流程示意图
1. 采用酶切或PCR扩增的方法将载体线性化。
2. 使用设计好的引物进行目的DNA片段的PCR扩增。
3. 按下表将目的DNA片段和线性化载体以摩尔比2:1加入离心管:
4. 混匀后在42℃孵育30分种,然后转移到冰上。
5. 使用5μL反应液转化感应态细菌。