2× SYBR Green qPCR Mix

一、试剂盒简介

本试剂盒采用具有超强扩增能力和抗干扰能力的热启动DNA聚合酶，结合其高度优化的缓冲液体系和染料系统，使之具备更强的扩增效率、抗干扰能力，更高的灵敏度和特异性。在相同的情况下具有起峰更早、得到的荧光信号更强、Ct值更小及熔解曲线特异性更高等特点。

二、产品组分

Components	A0001	A0001 -L
2× SYBR Green qPCR Master Mix*1	5 ml	25 ml
50× ROX Reference Dye 1*2	220 µl	220 µl × 5 tubes
50× ROX Reference Dye 2*2	220 µl	220 µl × 5 tubes

*1: 包含热启动DNA聚合酶, dNTPs, Mg2+, buffer, and SYBR Green I染料。
*2: 用于校正不同孔之间的荧光信号误差。

三、试剂保存条件

该试剂建议置于-20℃避光保存。

四、适用的仪器型号

ROX染料选择（请根据仪器型号选用不同的ROX）

Do Not Use ROX	Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™,Opticon®, Opticon 2, Chromo4™; Roche LightCyclerTM 96, Roche LightCyclerTM 480; Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2s; Illumina Eco qPCR; Qiagen/Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000; Thermo Scientific PikoReal Cycler; Analytikjena qTOWER 3G; Cepheid SmartCycler®.
Use ROX 1 (1×)	ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, 7900HT Fast; StepOne™, StepOne Plus™.
Use ROX 2 (1×)	ABI 7500, 7500 Fast, Quant-Studio 3, 5, 6, 7, 12K Flex, Dx, ViiA™7; Stratagene MX4000™, MX3000P™, MX3005P™.

五、注意事项

使用前，将2× SYBR Green qPCR Master Mix及ROX试剂从-20°C冰箱中取出，室温放置5 ~ 10分钟或用手紧握试剂管使之充分融化，上下颠倒10次充分混匀（非常重要），然后使用离心机短暂离心至管底，放在冰上备用。

六、关于qPCR反应是否良好的判断
1、如果扩增曲线呈典型的S型曲线，荧光背景信号阶段、荧光信号指数扩增阶段及平台期均完整可见，熔解曲线单峰，内参Ct值在合理范围内（通常可在13 ~ 22之间，典型的内参Ct值在15 ~ 20之间），则可认为该反应正常；
2、如果同一个模板和引物的重复孔数据Ct值相差0.5以内；
同时满足以上两个条件的可以认为数据可用。

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