Language
产品简介
本产品提供了一种简单、快速、可靠的方法，用于从多种来源的动物细胞分离纯化高质量的总RNA，无需使用苯酚、氯仿、异丙醇和DEPC水等有毒物质。纯化后的总RNA适用于多种下游应用，包括：RT-PCR、RT-qPCR等。
产品组分
组分 | B0004-plus (100 Preps) |
Lysis Buffer | 55 ml |
Wash Buffer*1 | 13 ml |
Elution Buffer | 10 ml |
DNA Removing Spin Columns (with Collection Tubes) | 100 Preps |
Spin Columns for RNA (with Collection Tubes) | 100 Preps |
注:*1. Wash Buffer首次使用前，请加入52 ml的无水乙醇并充分混匀，加好混匀后可在瓶身做好标记。
保存条件
本产品中的DNA Removing Spin Columns需避光保存在4°C，其余所有组分保存在室温，可稳定保存12个月。过期日期详见产品标签中有效期信息。
产品特点
1. 简单快速：可在 ~ 8分钟内获取高质量的总RNA。
2. 安全无毒：无需苯酚、氯仿、异丙醇和DEPC水等有毒试剂，无需乙醇沉淀。
3. 无基因组残留：使用独特的DNA清除柱高效去除残留的gDNA。
4. 纯度高：提取的RNA可用于多种下游实验，如RT-PCR、RT-qPCR等。
实验流程
注意事项
1. Wash Buffer使用前须加入52 ml的无水乙醇并充分混匀（Wash Buffer与无水乙醇的体积比为1:4），加好混匀后可在瓶身做好标记。
2. 85%乙醇的配制方法：按照无水乙醇:灭过菌的ddH2O = 85:15的体积比例进行配制。
3. 建议把Elution Buffer分装为3 ~ 4份，以减小污染的概率。
4. RNA提取须在室温进行，提取过程中不可置于冰上。
5. 建议用6孔板或35 mm培养皿培养细胞，培养至细胞密度达到80%以上时进行RNA提取，不建议用100 mm培养皿培养的细胞直接裂解提取RNA，否则可能导致细胞裂解不充分或离心柱堵塞或导致基因组残留。
6. 细胞充分裂解以后，如果不想立即进行RNA提取，可将裂解产物转移至离心管中，冻存于-80°C冰箱中；提取RNA时，需要解冻并恢复到室温才可进行后续的实验步骤。
7. 洗脱RNA时，应将洗脱液加到离心柱中央的膜上（如果洗脱液加到侧壁上，会导致RNA没有被溶解而使产量大大减少），同时注意避免移液器枪尖将膜刺破。
代表性实验结果
1. 使用本产品从A549细胞中提取的RNA用Nanodrop检测的结果
由图可见，本产品提取的RNA具有很好的纯度和较高的浓度。从A549细胞中提取RNA用琼脂糖凝胶电泳检测的结果（30 μl Elution Buffer洗脱/溶解RNA，取5 μl上样）。M：250bp DNA Ladder，Lanes 1为TRIzol (Invitrogen)方法提取的RNA；Lanes 2为本产品提取的RNA。由图可知：本产品提取RNA的得率明显高于TRIzol方法。
相关详细信息，请查看产品说明书。
